[發明專利]一種茶葉和茶湯中螺螨酯殘留分析測定方法

在審

• 申請號: 202110067696.X
• 申請日: 2021-01-19
• 公開（公告）號: CN112946097A
• 公開（公告）日: 2021-06-11
• 發明（設計）人: 張新忠;黎洪霞;羅逢健
• 申請（專利權）人: 中國農業科學院茶葉研究所
• 主分類號: G01N30/02
• 分類號: G01N30/02;G01N30/06
• 代理公司: 杭州浙科專利事務所(普通合伙) 33213
• 代理人: 沈淵琪

1.一種茶葉和茶湯中螺螨酯殘留分析測定方法，其特征在于包括以下步驟：

1）茶鮮葉、綠茶、紅茶樣品：稱取樣品于離心管中，加入1%甲酸水渦旋混勻，靜置，加入1-5%甲酸乙腈或乙酸乙腈，渦旋混勻，靜置后均質，加入NaCl，振蕩后超聲，再離心取出上清液，殘渣再加入1-5%甲酸乙腈或乙酸乙腈重復提取一次，合并兩次上清液，濃縮至干后，用1-5%甲酸乙腈或乙酸乙腈超聲復溶，轉移至裝有C₁₈、GCB、MgSO₄的離心管中，渦旋混勻后振蕩，再離心，取上清液濃縮至干，乙腈定容，過0.22 μm濾膜，備用；

或2）茶湯樣品：茶水沖泡后，雙層濾紙過濾得到茶湯樣品，量取茶湯置于離心管中，加入1-5%甲酸乙腈或乙酸乙腈，渦旋混勻，加入NaCl，振蕩后離心，取上層清液于燒瓶中，下層再加入1-5%甲酸乙腈或乙酸乙腈重復提取一次，轉移合并兩次上清液，濃縮至干，乙腈定容，過0.22 μm濾膜，備用；

3）超高效液相色譜-串聯質譜基質外標法測定。

2.如權利要求1所述的一種茶葉和茶湯中螺螨酯殘留分析測定方法，其特征在于所述步驟1）中當樣品是茶鮮葉時，1%甲酸水與茶鮮葉的體積質量比為2：1 mL/g；第一次和第二次1-5%甲酸乙腈或乙酸乙腈加入量與茶鮮葉的體積質量比為4：1 mL/g；用1-5%甲酸乙腈或乙酸乙腈超聲復溶時加入量與茶鮮葉的體積質量比為2：1 mL/g。

3.如權利要求1所述的一種茶葉和茶湯中螺螨酯殘留分析測定方法，其特征在于所述步驟1）中當樣品是綠茶/紅茶時，1%甲酸水與綠茶/紅茶的體積質量比為5：1 mL/g；第一次和第二次1-5%甲酸乙腈或乙酸乙腈加入量與綠茶/紅茶的體積質量比為5：1 mL/g；用1-5%甲酸乙腈或乙酸乙腈超聲復溶時加入量與綠茶/紅茶的體積質量比為5：1 mL/g。

4.如權利要求1所述的一種茶葉和茶湯中螺螨酯殘留分析測定方法，其特征在于所述步驟1）中加入1%甲酸水渦旋混勻后靜置30 min；所述加入1-5%甲酸乙腈或乙酸乙腈后渦旋混勻，靜置2 h后均質1-3 min；所述加入NaCl后震蕩5 min，超聲10 min，7500 r/min下離心5 min；所述濃縮至干過程中溫度均為42℃；所述超聲復溶后將溶液于4000 r/min下離心5min，取上清液至離心管中，渦旋混勻2 min，振蕩5 min，12000 r/min下離心5 min。

5.如權利要求1所述的一種茶葉和茶湯中螺螨酯殘留分析測定方法，其特征在于所述步驟1）中乙腈定容的加入量為1 mL。

6.如權利要求1所述的一種茶葉和茶湯中螺螨酯殘留分析測定方法，其特征在于所述步驟1）中裝有C₁₈、GCB、MgSO₄的離心管中C₁₈ 200 mg、GCB 50 mg、MgSO₄ 200 mg。

7.如權利要求1所述的一種茶葉和茶湯中螺螨酯殘留分析測定方法，其特征在于所述步驟2）中茶水的茶與水的質量比為1：50，水溫100 ℃沖泡10 min；所述茶湯與1-5%甲酸乙腈或乙酸乙腈的體積比為1：1；所述NaCl與茶湯的質量體積比為8：25 g/mL；所述振蕩5min，離心條件為7500 r/min下離心5 min；所述乙腈定容加入量為1 mL。

8.如權利要求1或2或3或4或7所述的一種茶葉和茶湯中螺螨酯殘留分析測定方法，其特征在于所述1-5%甲酸乙腈或乙酸乙腈優選為1%甲酸乙腈。

9.如權利要求1所述的一種茶葉和茶湯中螺螨酯殘留分析測定方法，其特征在于所述步驟3）中色譜條件為：Acquity UPLC BEH C₁₈色譜柱100 mm × 2.1 mm × 1.7 μm；柱溫40℃；進樣量5 μL；流動相A：0.1%甲酸乙腈溶液；流動相B：10 mmol/L乙酸銨水溶液，梯度洗脫程序見表1。

10.如權利要求1所述的一種茶葉和茶湯中螺螨酯殘留分析測定方法，其特征在于所述步驟3）中質譜條件為：電噴霧正電離多反應監測模式ESI⁺-MRM；噴霧毛細管電壓3.5 kV；離子源溫度150 ℃；脫溶劑氣N₂溫度350 ℃，流速750 L/h；錐孔反吹氣N₂流速50 L/h；碰撞氣Ar流速0.25 mL/min；電子倍增器倍增電壓700 V，螺螨酯二級質譜參數見表1；

表1螺螨酯的UPLC-MS/MS檢測條件