[發明專利]一種茶葉和茶湯中螺螨酯殘留分析測定方法

在審

• 申請號: 202110067696.X
• 申請日: 2021-01-19
• 公開（公告）號: CN112946097A
• 公開（公告）日: 2021-06-11
• 發明（設計）人: 張新忠;黎洪霞;羅逢健
• 申請（專利權）人: 中國農業科學院茶葉研究所
• 主分類號: G01N30/02
• 分類號: G01N30/02;G01N30/06
• 代理公司: 杭州浙科專利事務所(普通合伙) 33213
• 代理人: 沈淵琪

一種茶葉和茶湯中螺螨酯殘留分析測定方法，屬于茶葉殺螨劑殘留檢測技術領域。包括1）茶鮮葉、綠茶/紅茶樣品：1%甲酸水浸泡，加入1?5%甲酸乙腈或乙酸乙腈提取，再加入NaCl，離心后，取出上清液，殘渣再加入1?5%甲酸乙腈或乙酸乙腈重復提取，合并上清液濃縮至干，甲酸乙腈復溶后轉移至裝有C₁₈、GCB、MgSO₄的離心管中，凈化離心，分取上清液濃縮至干，乙腈定容；2）茶湯樣品：茶湯加入1?5%甲酸乙腈或乙酸乙腈混勻，加入NaCl，離心后，取出上清液，下層重復提取，合并上清液濃縮至干，乙腈定容；3）超高效液相色譜?質譜基質外標法測定。本方法滿足殘留分析要求，能滿足茶葉和茶湯中螺螨酯殘留檢測的需要。

技術領域

本發明屬于茶葉殺螨劑殘留檢測技術領域，具體涉及一種茶葉和茶湯中螺螨酯殘留分析測定方法。

背景技術

螺螨酯（Spirodiclofen，C₂₁H₂₄Cl₂O₄，CAS N_O. 148477-71-8，化學結構式見圖1），商品名為螨危，是德國拜耳作物科學公司研制并在1993年申請專利的一種具有季酮酸新穎化學結構的高效低毒的非內吸性殺螨劑，其作用機制是通過抑制害螨體內的脂肪合成，破壞害螨的能量代謝活動，最終殺死害螨，主要用于防治柑橘類植物、葡萄、梨果、核果、堅果等植物上的害螨。目前，螺螨酯已經在世界上近50個國家取得登記和上市，自2004年在我國柑橘上取得臨時登記以來，現已被我國登記用于冬棗、柑橘樹、觀賞月季、棉花、蘋果樹、薔薇科觀賞花卉、櫻桃等作物，并且針對其在油料和油脂、蔬菜、水果、堅果、飲料等食品中制定了最大殘留限量值，在0.004 mg/kg~ 40 mg/kg之間。但目前國內外對螺螨酯的研究主要在對其原藥及制劑分析和田間藥效上，而對其在作物上的殘留降解研究較少，集中在柑橘類、蘋果、枸杞和火龍果等，常用的殘留分析方法包括氣相色譜法、液相色譜法和氣相色譜–質譜聯用法等。

茶葉是一種重要的經濟作物，化學農藥的使用有助于防治茶樹病蟲害，從而提高茶葉產量、增加農民收入。然而，農藥的不合理使用引起的殘留問題也受到越來越多的關注。近年來，我國茶園主要登記使用有苦參堿、礦物油和石硫合劑來防治茶毛蟲、茶橙癭螨、葉螨和紅蜘蛛等。有研究表明，24%螨危（螺螨酯）懸浮劑采用3000～5000倍液防治茶橙癭螨，藥后1 d的防治效果即達 81.08%～99.37%，藥后15 d防治效果達100%，速效性和持效性均較好，可作為茶園替代農藥用于防治茶橙癭螨來減少現有農藥的抗性。然而，目前國內外未見到專門針對茶葉和茶湯中螺螨酯的殘留分析的方法報道。雖然現有技術中公開了螺螨酯在柑橘和土壤等中的殘留分析，同樣采用液相色譜質譜檢測，但條件不同，與本申請區別在于：本申請進行了前處理優化和液相質譜條件改進，涉及到的樣本處理基質也更復雜。

發明內容

針對上述現有技術中存在的缺陷，本發明的目的在于設計提供一種茶葉和茶湯中螺螨酯殘留分析測定方法。本方法在茶鮮葉、紅茶和綠茶、紅茶湯和綠茶湯中的定量限（LOQs）分別為0.002 mg/kg、0.005 mg/kg和0.0002 mg/L，滿足殘留分析的要求，能夠用于茶葉和茶湯中螺螨酯殘留檢測的需要。本申請中茶鮮葉是指直接從茶樹上采摘的葉片；紅茶、綠茶是指經過加工的茶葉。

一種茶葉和茶湯中螺螨酯殘留分析測定方法，其特征在于包括以下步驟：

1）茶鮮葉、綠茶、紅茶樣品：稱取樣品于離心管中，加入1%甲酸水渦旋混勻，靜置，加入1-5%甲酸乙腈或乙酸乙腈，渦旋混勻，靜置后均質，加入NaCl，振蕩后超聲，再離心取出上清液，殘渣再加入1-5%甲酸乙腈或乙酸乙腈重復提取一次，合并兩次上清液，濃縮至干后，用1-5%甲酸乙腈或乙酸乙腈超聲復溶，轉移至裝有C₁₈、GCB、MgSO₄的離心管中，渦旋混勻后振蕩，再離心，取上清液濃縮至干，乙腈定容，過0.22 μm濾膜，備用；