[發明專利]一種同時檢測兩種水溶性真菌毒素試紙條制備方法

在審

• 申請號: 202110066465.7
• 申請日: 2021-01-19
• 公開（公告）號: CN112881679A
• 公開（公告）日: 2021-06-01
• 發明（設計）人: 黃志兵;謝建華;黃馨雨
• 申請（專利權）人: 南昌大學
• 主分類號: G01N33/558
• 分類號: G01N33/558;G01N33/543;G01N33/577
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1.一種同時檢測兩種水溶性真菌毒素試紙條的制備方法，其特征在于：所述制備方法包括以下步驟：

(1)DON單克隆抗體-花納米顆粒標記物和FB₁單克隆抗體-15-18nm球形納米金標記物標記物的制備

在磁力攪拌下，向盛有3mL15-18 nm球形金花納米溶液或膠體金溶液中加入K₂CO₃溶液調節溶液的pH為5.0-6.5，分別取DON抗體和FB₁抗體各5-10μL，稀釋后，逐漸加入到金花納米溶液或膠體金溶液中，反應60min，然后分別加入BSA和PEG-20000，反應30min后，10000rpm離心60min，沉淀用金子稀釋液復溶，得到DON單克隆抗體-花納米顆粒標記物，同時按照同樣的方法制備二抗與膠體金和金花復合物，用于信號放大；

(2)金標結合物釋放墊的處理

將金標結合物釋放墊放入金子稀釋液中浸泡30min，37℃真空干燥，將金標抗體復合物和二抗與膠體金或金花復合物混合均勻，然后均勻的噴入到金標墊上；

(3)硝酸纖維素膜的包被

將真菌毒素檢測抗原噴在硝酸纖維素膜上，分別作為檢測線，羊抗鼠Ig G作為質控線；

(4)試紙條的制作

將上述噴有真菌毒素檢測抗原和羊抗鼠IgG的硝酸纖維素膜吸水墊、樣品墊粘貼在PVP底板上，然后條切條后即為同時檢測兩種真菌毒素的試紙條。

2.根據權利要求1所述制備方法，其特征在于：所述步驟(1)中K₂CO₃溶液為1％，30mL。

3.根據權利要求1所述制備方法，其特征在于：所述步驟(1)中BSA加入量為10％100μL，PEG-20000加入量為5％100μL。

4.根據權利要求1所述制備方法，其特征在于：所述步驟(1)中金子稀釋液是0.5％BSA、5％蔗糖、0.5％PEG-20000的濃度為0.01M的PBS溶液。