[發明專利]提高降解醇溶蛋白能力的蛋白酶突變體及其編碼基因和應用

有效

• 申請號: 202110066370.5
• 申請日: 2021-01-19
• 公開（公告）號: CN112574978B
• 公開（公告）日: 2021-08-17
• 發明（設計）人: 肖志壯;方安然;孫建飛;于文君;付五兵;王金龍
• 申請（專利權）人: 青島尚德生物技術有限公司
• 主分類號: C12N9/56
• 分類號: C12N9/56;C12N15/57;C12N15/10
• 代理公司: 青島合創知識產權代理事務所(普通合伙) 37264
• 代理人: 王曉曉

1.一種提高降解醇溶蛋白能力的蛋白酶突變體APR01，其特征在于，所述蛋白酶突變體APR01的氨基酸序列如SEQ ID NO：5所示；所述蛋白酶突變體APR01是由氨基酸序列為SEQID NO：1的蛋白酶的第234位的絲氨酸變為色氨酸獲得的。

2.權利要求1所述的蛋白酶突變體APR01的編碼基因，其特征在于，所述蛋白酶突變體APR01的編碼基因的核苷酸序列如SEQ ID NO：6所示。

3.一種提高降解醇溶蛋白能力的蛋白酶突變體APR02，其特征在于，所述蛋白酶突變體APR02的氨基酸序列如SEQ ID NO：7所示；所述蛋白酶突變體APR02是由氨基酸序列為SEQID NO：1的蛋白酶的第234位的絲氨酸變為色氨酸以及第263位的絲氨酸變為異亮氨酸獲得的。

4.權利要求3所述的蛋白酶突變體APR02的編碼基因，其特征在于，所述蛋白酶突變體APR02的編碼基因的核苷酸序列如SEQ ID NO：8所示。

5.一種提高降解醇溶蛋白能力的蛋白酶突變體APR03，其特征在于，所述蛋白酶突變體APR03的氨基酸序列如SEQ ID NO：9所示；所述蛋白酶突變體APR03是由氨基酸序列為SEQID NO：1的蛋白酶的第234位的絲氨酸變為色氨酸以及第264位的甘氨酸變為色氨酸獲得的。

6.權利要求5所述的蛋白酶突變體APR03的編碼基因，其特征在于，所述蛋白酶突變體APR03的編碼基因的核苷酸序列如SEQ ID NO：10所示。

7.一種提高降解醇溶蛋白能力的蛋白酶突變體APR04，其特征在于，所述蛋白酶突變體APR04的氨基酸序列如SEQ ID NO：11所示；所述蛋白酶突變體APR04由氨基酸序列為SEQ IDNO：1的蛋白酶的第53位的纈氨酸變為丙氨酸、第161位的酪氨酸變為組氨酸以及第234位的絲氨酸變為色氨酸獲得。

8.權利要求7所述的蛋白酶突變體APR04的編碼基因，其特征在于，所述蛋白酶突變體APR04的編碼基因的核苷酸序列如SEQ ID NO：12所示。

9.含有權利要求2所述的蛋白酶突變體APR01的編碼基因、或含有權利要求4所述的蛋白酶突變體APR02的編碼基因、或含有權利要求6所述的蛋白酶突變體APR03的編碼基因、或含有權利要求8所述的蛋白酶突變體APR04的編碼基因的重組菌株。

10.權利要求1所述的蛋白酶突變體APR01、或權利要求3所述的蛋白酶突變體APR02、或權利要求5所述的蛋白酶突變體APR03、或權利要求7所述的蛋白酶突變體APR04在用于制備降解醇溶蛋白的生物制劑中的應用。