[發(fā)明專利]一種化學(xué)酶法合成N-[(3R,6R)-6-甲基哌啶-3-基]氨基甲酸叔丁酯的方法

有效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 202110064644.7
• 申請(qǐng)日: 2021-01-18
• 公開（公告）號(hào): CN112877379B
• 公開（公告）日: 2023-09-01
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 李彤;李杉;張雷
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 華南理工大學(xué)
• 主分類號(hào): C12P17/12
• 分類號(hào): C12P17/12;C07D211/56
• 代理公司: 深圳市精英專利事務(wù)所 44242
• 代理人: 巫苑明

1.一種化學(xué)酶法合成N-[(3R,6R)-6-甲基哌啶-3-基]氨基甲酸叔丁酯的方法，其特征在于，包括以下步驟：

S1、以Boc-D-焦谷氨酸乙酯為底物，在-10～0℃下與甲基鹵化鎂反應(yīng)得到酶催化底物；

S2、將酶催化底物加入含有氨基供體的磷酸鉀緩沖液中，再加入磷酸吡哆醛和轉(zhuǎn)氨酶，通過自發(fā)原位環(huán)化反應(yīng)得到雙手性中心的內(nèi)酰胺；

所述步驟S2中，轉(zhuǎn)氨酶為SCUT-ATA-01，氨基供體為異丙胺；所述磷酸鉀緩沖液中，異丙胺的含量為1M，反應(yīng)溫度為35～50℃，反應(yīng)時(shí)間為12～16h，pH為11；

S3、使內(nèi)酰胺發(fā)生還原反應(yīng)，得到N-[(3R,6R)-6-甲基哌啶-3-基]氨基甲酸叔丁酯；

其中，所述酶催化底物的結(jié)構(gòu)式為內(nèi)酰胺的結(jié)構(gòu)式為

2.如權(quán)利要求1所述的化學(xué)酶法合成N-[(3R,6R)-6-甲基哌啶-3-基]氨基甲酸叔丁酯的方法，其特征在于，所述步驟S1中，包括以下步驟：先將Boc-D-焦谷氨酸乙酯加入到裝有第一溶劑的反應(yīng)容器中，并通入惰性氣體保護(hù)，在-10～0℃加入甲基鹵化鎂，攪拌均勻后升溫至5～10℃，待反應(yīng)完全后用淬滅劑淬滅，加入萃取劑萃取并用正己烷打漿得到酶催化底物。

3.如權(quán)利要求2所述的化學(xué)酶法合成N-[(3R,6R)-6-甲基哌啶-3-基]氨基甲酸叔丁酯的方法，其特征在于，所述第一溶劑為二甲基四氫呋喃、四氫呋喃和無水四氫呋喃中的至少一種。

4.如權(quán)利要求1或2所述的化學(xué)酶法合成N-[(3R,6R)-6-甲基哌啶-3-基]氨基甲酸叔丁酯的方法，其特征在于，所述Boc-D-焦谷氨酸乙酯和甲基鹵化鎂的投料摩爾比為1:1.3～1.8；所述甲基鹵化鎂為甲基溴化鎂、甲基氯化鎂和甲基碘化鎂中的至少一種。

5.如權(quán)利要求1所述的化學(xué)酶法合成N-[(3R,6R)-6-甲基哌啶-3-基]氨基甲酸叔丁酯的方法，其特征在于，所述步驟S3中，還原反應(yīng)包括以下步驟：將內(nèi)酰胺溶于第二溶劑中，在0～10℃下，分批加入硼氫化鈉，再加入三氟化硼四氫呋喃溶液，升溫至20～25℃，反應(yīng)后用淬滅劑淬滅，升溫回流后減壓濃縮，用萃取劑萃取后旋干有機(jī)相，得到N-[(3R,6R)-6-甲基哌啶-3-基]氨基甲酸叔丁酯。

6.如權(quán)利要求5所述的化學(xué)酶法合成N-[(3R,6R)-6-甲基哌啶-3-基]氨基甲酸叔丁酯的方法，其特征在于，所述內(nèi)酰胺、硼氫化鈉和三氟化硼四氫呋喃的投料摩爾比分別為1:2～3.5：1～3.5。

7.如權(quán)利要求5所述的化學(xué)酶法合成N-[(3R,6R)-6-甲基哌啶-3-基]氨基甲酸叔丁酯的方法，其特征在于，所述第二溶劑為無水四氫呋喃。

8.如權(quán)利要求2或5所述的化學(xué)酶法合成N-[(3R,6R)-6-甲基哌啶-3-基]氨基甲酸叔丁酯的方法，其特征在于，所述淬滅劑為甲醇和飽和氯化銨溶液中的至少一種，所述萃取劑為乙酸乙酯。