[發明專利]用于同時檢測復合酸化劑中6種酸化劑的方法

在審

• 申請號: 202110061465.8
• 申請日: 2021-01-18
• 公開（公告）號: CN112763629A
• 公開（公告）日: 2021-05-07
• 發明（設計）人: 徐文娟;劉惠芳;洪偉
• 申請（專利權）人: 上海美農生物科技股份有限公司
• 主分類號: G01N30/02
• 分類號: G01N30/02;G01N30/06
• 代理公司: 上海智信專利代理有限公司 31002
• 代理人: 王潔

本發明涉及一種用于同時檢測復合酸化劑中6種酸化劑的方法，所述的復合酸化劑中的6種酸化劑分別為甲酸鈣、蘋果酸、乳酸、乙酸、富馬酸和丙酸鈣，所述的方法包括步驟：(1)、制備系列混合標準液、待檢測樣品溶液；(2)、在預設色譜條件下，將步驟(1)中的系列混合標準液注入高效液相色譜儀中，進行色譜分析，以保留時間定性，繪制相應酸化劑的標準曲線；(3)、在預設色譜條件下，將待檢測樣品溶液注入高效液相色譜儀中進樣分析，定量計算所述的樣品溶液中6種酸化劑的濃度和含量；在所述的預設色譜條件中，色譜柱為反相C18，流動相為pH＝2.4～2.6的0.01mol/L磷酸二氫銨水溶液。

技術領域

本發明涉及一種分析檢測技術領域，尤其涉及高效液相色譜分析檢測，具體是指一種用于同時檢測復合酸化劑中6種酸化劑的方法。

背景技術

復合酸化劑是將兩種或兩種以上的單一酸化劑按照一定的比例復合而成，可以是幾種酸配合在一起使用，也可以是酸和鹽類復配而成。在飼料中添加酸化劑后能夠調節消化道內環境，提高消化酶的活性；降低飼料系酸力；調節消化道微生物平衡；參與機體代謝；增強機體免疫力。復合酸化劑產品并不是由單一的酸化劑組成，為更好的酸化性能，幾種酸化劑按照合適的比率組成復合酸化劑。因此，如何有效的監控復合酸化劑的主成分和含量，已成為飼料公司、養殖戶以及飼料添加劑公司的關注熱點。

目前，關于酸化劑的檢測方法很多，最常見的有比色法、熒光法、分光光度法、高效液相色譜法、離子交換色譜法、毛細管電泳法、氣相色譜法等，但這些檢測方法大多是針對單一有機酸，或用氣相檢測多種有機酸時需要用到特定的FFAP柱子(價格昂貴、適用性不廣泛)。因此，當需要檢測復合酸化劑中的酸化劑成分時，需要采用各自的前處理技術和分析方法，檢測費時、費力，并且消耗資金大。也有采用串聯質譜法檢測多種有機酸的報道，但這種分析儀器造價高昂，不便于在我國飼料行業普遍推廣。相比較高效液相色譜法更適用于實踐生產中檢測有機酸的含量，簡單、快速。

發明內容

本發明的目的是克服了上述現有技術的缺點，提供了一種用于同時檢測復合酸化劑中6種酸化劑的方法，該方法使用的是高效液相色譜儀，處理樣品方式簡單，分析速度快，檢測靈敏度高，結果準確可靠，所用設備常見易得，適用于飼料復合酸化劑中甲酸鈣、蘋果酸、乳酸、乙酸、富馬酸、丙酸鈣含量的檢測。

為了實現上述目的，本發明提供了一種用于同時檢測復合乳化劑中3種乳化劑的方法，具體如下：

所述的復合酸化劑中的6種酸化劑分別為甲酸鈣、蘋果酸、乳酸、乙酸、富馬酸和丙酸鈣，所述的方法包括步驟：

(1)、制備系列混合標準液、待檢測樣品溶液；

(2)、在預設色譜條件下，將步驟(1)中的系列混合標準液注入高效液相色譜儀中，進行色譜分析，以保留時間定性，根據各酸化劑所測峰面積的大小與相應濃度的對應關系繪制相應酸化劑的標準曲線；

(3)、在步驟(2)中的預設色譜條件下，將步驟(1)中的待檢測樣品溶液注入高效液相色譜儀中進樣分析，以保留時間定性，根據步驟(2)中所得的各酸化劑的標準曲線，定量計算所述的樣品溶液中6種酸化劑的濃度和含量；

在所述的預設色譜條件中，色譜柱為反相C18，流動相為pH＝2.4～2.6的0.01mol/L磷酸二氫銨水溶液。

較佳地，所述的步驟(1)中制備系列混合標準液具體包括步驟：

(1-1)制備混合標準品工作液：分別準確吸取10.00mL5mg/mL的甲酸鈣標準儲備液、10.00mL20mg/mL的乳酸鈣標準儲備液、1.00mL1mg/mL的富馬酸標準儲備液、10.00mL5mg/mL的乙酸標準儲備液、10.00mL5mg/mL的蘋果酸標準儲備液、10.00mL5mg/mL的丙酸鈣標準儲備液于250mL燒杯中，使用1mol/L磷酸溶液調節pH至2.10～2.30，將溶液轉移至100mL容量瓶中，用水定容到刻度，混勻；