[發(fā)明專利]一種聚谷氨酸載體佐劑的制備方法

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• 申請日: 2021-01-16
• 公開（公告）號: CN112717126A
• 公開（公告）日: 2021-04-30
• 發(fā)明（設計）人: 申鶴云;任美;白林濤;高干;馮越
• 申請（專利權）人: 北京化工大學
• 主分類號: A61K39/00
• 分類號: A61K39/00;A61K39/39;A61K9/51;A61K47/34;A61P35/00;A61P37/04
• 代理公司: 北京思海天達知識產權代理有限公司 11203
• 代理人: 劉萍

1.一種聚氨基酸納米載體佐劑，其特征在于，是以α-聚谷氨酸(α-PGA)接枝聚合物為載體，通過疏水相互作用自組裝包裹抗原-卵清蛋白(OVA)，形成粒徑為200-300nm的粒子。

2.一種聚氨基酸納米載體佐劑的制備方法，其特征在于，

將α-PGA溶解在NaHCO₃溶液中至完全溶解，之后在冰浴條件下加入N-(3-二甲氨基丙基)-N'-乙基碳二亞胺鹽酸鹽(EDC·HCl)活化10min；然后將苯丙氨酸(F)加入到上述反應體系中，在冰浴條件下繼續(xù)反應1h；之后撤去冰浴，在室溫條件下反應15小時；最后將反應溶液轉入透析袋中進行透析，至完全除去未反應的小分子物質，透析完畢后將反應液進行凍干得到α-PGA-F；將凍干的α-PGA-F溶解于二甲基亞砜(DMSO)，隨后與OVA水溶液混合，同時吸打；將上述溶液離心除去上清液，再使用純水清洗兩次，即得到OVA@α-PGA-F；

α-PGA重復單元、EDC·HCl、F和NaHCO₃的摩爾比為5:3:3:5；

透析袋截留分子量為15kDa，透析時間為2d，每3h更換一次透析水。

3.根據(jù)權利要求2所述的制備方法，其特征在于：NaHCO₃緩沖溶液的濃度為50mM，α-PGA-F溶液的濃度為10mg/mL，OVA溶液的濃度為0.5mg/mL，所述的α-PGA-F溶液和OVA溶液的體積比為1:1。

4.根據(jù)權利要求2所述的制備方法，其特征在于：所述的α-PGA的分子量為70kDa。

5.根據(jù)權利要求2所述的制備方法，其特征在于：10秒內吸打25次，離心轉數(shù)為14000rpm，時間為5min。

6.一種由權利要求1～5任一項所述的制備方法制得的聚氨基酸納米載體佐劑。

7.一種由權利要求1～5任一項所述的制備方法制得的聚氨基酸納米載體佐劑在細胞溶酶體的pH4.5～5.5條件下誘導α-PGA產生α螺旋結構。