[發(fā)明專利]一種與花生百仁重主效QTL位點(diǎn)連鎖的分子標(biāo)記及其應(yīng)用

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 202110053275.1
• 申請日: 2021-01-15
• 公開（公告）號: CN112626260B
• 公開（公告）日: 2022-06-17
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 王志慧;廖伯壽;雷永;晏立英;陳玉寧;淮東欣;王欣;康彥平
• 申請（專利權(quán)）人: 中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院油料作物研究所
• 主分類號: C12Q1/6895
• 分類號: C12Q1/6895;C12Q1/6858;C12N15/11
• 代理公司: 北京路浩知識產(chǎn)權(quán)代理有限公司 11002
• 代理人: 商秀玲

1.一種與花生百仁重主效QTL位點(diǎn)連鎖的分子標(biāo)記組合，其特征在于，所述分子標(biāo)記組合由分子標(biāo)記Ah011476和分子標(biāo)記Ah011478組成；

所述分子標(biāo)記Ah011476位于花生B06染色體上如SEQ ID NO.7所示核苷酸序列的第22位，多態(tài)性為G或T；

所述分子標(biāo)記Ah011478位于花生B06染色體上如SEQ ID NO.8所示核苷酸序列的第24位，多態(tài)性為C或A。

2.一種用于擴(kuò)增如權(quán)利要求1所述分子標(biāo)記組合的KASP引物組合，其特征在于，所述KASP引物組合包括，用于檢測分子標(biāo)記Ah011476的KASP引物組合1和用于檢測分子標(biāo)記Ah011478的引物組合2；

所述引物組合1包括：

Allele-specific-FAM-F：5’-GTAGTTGCCGTGTTTGGCG-3’，

Allele-specific-VIC-F：5’-TCTGTAGTTGCCGTGTTTGGCT-3’，

Common-primer-R：5’-GAAGCTGAAAAGCTTGAGCCTCGTT-3’；

所述引物組合2包括：

Allele-specific-FAM-F：5’-GCGCTGTTTGTTGTGCTGTGC-3’,

Allele-specific-VIC-F：5’-ATAGCGCTGTTTGTTGTGCTGTGA-3’,

Common-primer-R：5’-CCAGTTAACAAATCTCAACCTATAGATGAA-3’ 。

3.一種試劑盒，其特征在于，所述試劑盒包括如權(quán)利要求2所述的KASP引物組合。

4.一種檢測花生百仁重的方法，其特征在于，包括：

提取待鑒定花生材料的DNA，通過PCR對所述待鑒定花生材料的如權(quán)利要求1所述分子標(biāo)記組合進(jìn)行鑒定；

若鑒定分子標(biāo)記Ah011476的多態(tài)性為G，且鑒定分子標(biāo)記Ah011478的基因型多態(tài)性為C，則所述待鑒定花生材料為高百仁重；

若鑒定分子標(biāo)記Ah011476的多態(tài)性為T，且鑒定分子標(biāo)記Ah011478的基因型多態(tài)性為A，則所述待鑒定花生材料為低百仁重。

5.根據(jù)權(quán)利要求4所述的方法，其特征在于，所述PCR的反應(yīng)程序?yàn)椋?/p>

94℃ 15min；94℃ 20s， 61~55℃ 60s，10個(gè)循環(huán)，且每個(gè)循環(huán)降低0.6℃；95℃ 20s，55℃ 60s，27個(gè)退火循環(huán)。

6.權(quán)利要求1所述分子標(biāo)記組合、或權(quán)利要求2所述引物組合、或權(quán)利要求3所述試劑盒、或權(quán)利要求4或5所述方法在花生遺傳改良中的應(yīng)用。

7.權(quán)利要求1所述分子標(biāo)記組合、或權(quán)利要求2所述引物組合、或權(quán)利要求3所述試劑盒、或權(quán)利要求4或5所述方法在高百仁重花生選育中的應(yīng)用。