[發(fā)明專利]一種快速檢測(cè)新型冠狀病毒D614G突變的引物組合物及試劑盒

在審

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 202110050940.1
• 申請(qǐng)日: 2021-01-14
• 公開（公告）號(hào): CN113151585A
• 公開（公告）日: 2021-07-23
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 曹國(guó)君;許笑;邢志芳;關(guān)明;唐雪梅;馬艷春
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 復(fù)旦大學(xué)附屬華山醫(yī)院北院
• 主分類號(hào): C12Q1/70
• 分類號(hào): C12Q1/70;C12Q1/6858;C12N15/11
• 代理公司: 上海申新律師事務(wù)所 31272
• 代理人: 郎祺

1.一種快速檢測(cè)新型冠狀病毒D614G突變的引物組合物，其特征在于，包括引物組和PNA探針；所述PNA探針的序列如SEQ ID NO：7所示；

所述引物組包括F3引物、B3引物、FIP引物、BIP引物和LB引物，選自包括序列如SEQ IDNO：2～6的組合物、包括序列如SEQ ID NO：14～18的組合物、包括序列如SEQ ID NO：19～23的組合物和包括序列如SEQ ID NO：24～28的組合物的一組或者幾組；或

所述引物組包括F3引物、B3引物、FIP引物、BIP引物、LB引物和LF引物，為序列如SEQ IDNO：8～13的組合物。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的引物組合物，其特征在于，所述引物組合物包括序列如SEQ IDNO：2～6的引物和序列如SEQ ID NO：7所示的PNA探針。

3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的引物組合物，其特征在于，所述引物組合物包括序列如SEQ IDNO：8～13的引物和序列如SEQ ID NO：7所示的PNA探針。

4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的引物組合物，其特征在于，所述引物組合物包括序列如SEQ IDNO：14～18的引物和序列如SEQ ID NO：7所示的PNA探針。

5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的引物組合物，其特征在于，所述引物組合物包括序列如SEQ IDNO：19～23的引物和序列如SEQ ID NO：7所示的PNA探針。

6.根據(jù)權(quán)利要求1所述的引物組合物，其特征在于，所述引物組合物包括序列如SEQ IDNO：24～28的引物和序列如SEQ ID NO：7所示的PNA探針。

7.一種包括如權(quán)利要求1-6任一項(xiàng)所述引物組合物的快速檢測(cè)新型冠狀病毒D614G突變的擴(kuò)增體系，其特征在于，還包括DNA模板、反應(yīng)緩沖液、DNA聚合酶、中性紅染料和/或熒光染料以及去離子水。

8.根據(jù)權(quán)利要求7所述的擴(kuò)增體系，其特征在于，在所述擴(kuò)增體系中，F(xiàn)3引物和B3引物的終濃度為0.2μmol/L；FIP引物和BIP引物的終濃度為1.6μmol/L；LB引物和LF引物的終濃度為0.8μmol/L；PNA探針的終濃度為0.8μmol/L。

9.根據(jù)權(quán)利要求8所述的擴(kuò)增體系，其特征在于，總體積為25μL的擴(kuò)增體系包括如下組分：2×反應(yīng)緩沖液12.5μL，F(xiàn)3引物1μL，B3引物1μL，F(xiàn)IP引物1μL，BIP引物1μL，LF引物0或者1μL，LB引物1μL，PNA探針1μL，8U酶溶液1μL，中性紅染料1μL，去離子水2.5μL或者1.5μL，DNA模板2μL。

10.一種包括如權(quán)利要求1-6任一項(xiàng)所述引物組合物的快速檢測(cè)新型冠狀病毒D614G突變的擴(kuò)增體系試劑盒，其特征在于，還包括反應(yīng)緩沖液、酶溶液、中性紅染料和/或熒光染料以及去離子水。