[發(fā)明專利]一種快速檢測新型冠狀病毒69-70del突變的引物組合物及試劑盒在審
| 申請?zhí)枺?/td> | 202110050934.6 | 申請日： | 2021-01-14 |
| 公開（公告）號： | CN113025748A | 公開（公告）日： | 2021-06-25 |
| 發(fā)明（設(shè)計）人： | 曹國君;邢志芳;許笑;關(guān)明;詹瓊;毛奇琦 | 申請（專利權(quán)）人： | 復(fù)旦大學(xué)附屬華山醫(yī)院北院 |
| 主分類號： | C12Q1/70 | 分類號： | C12Q1/70;C12Q1/6844;C12N15/11;C12R1/93 |
| 代理公司： | 上海申新律師事務(wù)所 31272 | 代理人： | 郎祺 |
| 地址： | 201900 *** | 國省代碼： | 上海;31 |
| 權(quán)利要求書： | 查看更多 | 說明書： | 查看更多 |
| 摘要： | |||
| 搜索關(guān)鍵詞： | 一種 快速 檢測 新型 冠狀病毒 69 70 del 突變 引物 組合 試劑盒 | ||
1.一種快速檢測新型冠狀病毒69-70del突變的引物組合物，其特征在于，包括引物組和PNA探針；所述PNA探針的序列如SEQ ID NO：8所示；
所述引物組包括F3引物、B3引物、FIP引物、BIP引物和LB引物，選自包括序列如SEQ IDNO：3～7的組合物、包括序列如SEQ ID NO：9～13的組合物、包括序列如SEQ ID NO：14～18的組合物和包括序列如SEQ ID NO：15和17～20的組合物的一組或者幾組。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的引物組合物，其特征在于，所述引物組合物包括序列如SEQ IDNO：3～7的引物和序列如SEQ ID NO：8所示的PNA探針。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的引物組合物，其特征在于，所述引物組合物包括序列如SEQ IDNO：9～13的引物和序列如SEQ ID NO：8所示的PNA探針。
4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的引物組合物，其特征在于，所述引物組合物包括序列如SEQ IDNO：14～18的引物和序列如SEQ ID NO：8所示的PNA探針。
5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的引物組合物，其特征在于，所述引物組合物包括序列如SEQ IDNO：15和17～20的引物和序列如SEQ ID NO：8所示的PNA探針。
6.一種包括如權(quán)利要求1-5任一項所述引物組合物的快速檢測新型冠狀病毒69-70del突變的擴增體系，其特征在于，還包括模板、反應(yīng)緩沖液、酶溶液、中性紅染料和/或熒光染料以及去離子水。
7.根據(jù)權(quán)利要求6所述的擴增體系，其特征在于，在所述擴增體系中，F(xiàn)3引物和B3引物的終濃度為0.2μmol/L；FIP引物和BIP引物的終濃度為1.6μmol/L；LB引物的終濃度為0.8μmol/L；PNA探針的終濃度為0.8μmol/L。
8.根據(jù)權(quán)利要求7所述的擴增體系，其特征在于，總體積為25μL的擴增體系包括如下組分：2×反應(yīng)緩沖液12.5μL，F(xiàn)3引物1μL，B3引物1μL，F(xiàn)IP引物1μL，BIP引物1μL，LB引物1μL，PNA探針1μL，8U酶溶液1μL，中性紅染料1μL，去離子水2.5μL，模板2μL。
9.根據(jù)權(quán)利要求6所述的擴增體系，其特征在于，所述擴增體系的反應(yīng)條件為58℃-68℃，30-60min；所用的設(shè)備為普通PCR儀或恒溫金屬浴。
10.一種包括如權(quán)利要求1-5任一項所述引物組合物的快速檢測新型冠狀病毒69-70del突變的擴增體系試劑盒，其特征在于，還包括反應(yīng)緩沖液、酶溶液、中性紅染料和/或熒光染料以及去離子水。
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