[發明專利]一種快速檢測新型冠狀病毒69-70del突變的引物組合物及試劑盒

在審

• 申請號: 202110050934.6
• 申請日: 2021-01-14
• 公開（公告）號: CN113025748A
• 公開（公告）日: 2021-06-25
• 發明（設計）人: 曹國君;邢志芳;許笑;關明;詹瓊;毛奇琦
• 申請（專利權）人: 復旦大學附屬華山醫院北院
• 主分類號: C12Q1/70
• 分類號: C12Q1/70;C12Q1/6844;C12N15/11;C12R1/93
• 代理公司: 上海申新律師事務所 31272
• 代理人: 郎祺

1.一種快速檢測新型冠狀病毒69-70del突變的引物組合物，其特征在于，包括引物組和PNA探針；所述PNA探針的序列如SEQ ID NO：8所示；

所述引物組包括F3引物、B3引物、FIP引物、BIP引物和LB引物，選自包括序列如SEQ IDNO：3～7的組合物、包括序列如SEQ ID NO：9～13的組合物、包括序列如SEQ ID NO：14～18的組合物和包括序列如SEQ ID NO：15和17～20的組合物的一組或者幾組。

2.根據權利要求1所述的引物組合物，其特征在于，所述引物組合物包括序列如SEQ IDNO：3～7的引物和序列如SEQ ID NO：8所示的PNA探針。

3.根據權利要求1所述的引物組合物，其特征在于，所述引物組合物包括序列如SEQ IDNO：9～13的引物和序列如SEQ ID NO：8所示的PNA探針。

4.根據權利要求1所述的引物組合物，其特征在于，所述引物組合物包括序列如SEQ IDNO：14～18的引物和序列如SEQ ID NO：8所示的PNA探針。

5.根據權利要求1所述的引物組合物，其特征在于，所述引物組合物包括序列如SEQ IDNO：15和17～20的引物和序列如SEQ ID NO：8所示的PNA探針。

6.一種包括如權利要求1-5任一項所述引物組合物的快速檢測新型冠狀病毒69-70del突變的擴增體系，其特征在于，還包括模板、反應緩沖液、酶溶液、中性紅染料和/或熒光染料以及去離子水。

7.根據權利要求6所述的擴增體系，其特征在于，在所述擴增體系中，F3引物和B3引物的終濃度為0.2μmol/L；FIP引物和BIP引物的終濃度為1.6μmol/L；LB引物的終濃度為0.8μmol/L；PNA探針的終濃度為0.8μmol/L。

8.根據權利要求7所述的擴增體系，其特征在于，總體積為25μL的擴增體系包括如下組分：2×反應緩沖液12.5μL，F3引物1μL，B3引物1μL，FIP引物1μL，BIP引物1μL，LB引物1μL，PNA探針1μL，8U酶溶液1μL，中性紅染料1μL，去離子水2.5μL，模板2μL。

9.根據權利要求6所述的擴增體系，其特征在于，所述擴增體系的反應條件為58℃-68℃，30-60min；所用的設備為普通PCR儀或恒溫金屬浴。

10.一種包括如權利要求1-5任一項所述引物組合物的快速檢測新型冠狀病毒69-70del突變的擴增體系試劑盒，其特征在于，還包括反應緩沖液、酶溶液、中性紅染料和/或熒光染料以及去離子水。