[發明專利]靶向B7-H3的CAR-T細胞及其在急性髓系白血病治療中的應用

在審

• 申請號: 202110044539.7
• 申請日: 2021-01-13
• 公開（公告）號: CN114763388A
• 公開（公告）日: 2022-07-19
• 發明（設計）人: 楊林;游鳳濤;范雙雙;李亞芬
• 申請（專利權）人: 博生吉醫藥科技（蘇州）有限公司
• 主分類號: C07K19/00
• 分類號: C07K19/00;C12N15/62;C12N15/867;C12N5/10;C12N1/21;A61K39/00;A61P35/00;A61P35/02;C12R1/19
• 代理公司: 上海一平知識產權代理有限公司 31266
• 代理人: 肖艷;徐迅

本發明提供了靶向B7?H3的CAR?T細胞及其在急性髓系白血病治療中的應用。具體地，本發明提供了一種靶向B7?H3的CAR?T細胞，其包含靶向B7?H3的scFv，41BB共刺激信號分子和CD3ζ結構域。本發明的B7?H3?CAR?T細胞對B7?H3陽性的AML腫瘤細胞具有顯著的特異性殺傷，動物實驗結果顯示，B7?H3?CAR?T細胞可以顯著抑制小鼠體內AML腫瘤細胞的生長，明顯延長小鼠的生存期，具有顯著的體內抗腫瘤作用。本發明的B7?H3?CAR?T細胞可以作為一種靶向治療AML的新型治療方法，具有巨大的臨床應用前景。

技術領域

本發明涉及生物技術領域，更具體地涉及一種靶向B7-H3的CAR-T細胞及其在急性髓系白血病治療中的應用。

背景技術

急性髓系白血病(Acute M yeloid Leukemia，AML)是急性白血病中常見的一種類型，是種起源于造血組織、高度異質性的惡性克隆性疾病，患者病死率高，長期生存率低，而且易復發，嚴重危害人類的健康和生命。幾十年來，對AML的治療方法基本沒有變化，主要手段為化療和造血干細胞移植。經典的化療方案仍然是蒽環類藥物聯合阿糖胞苷，該方案治療后雖然可以獲得相對較高的緩解率，但患者發生耐藥而復發的風險較高。

根據French-American-British(FAB)的AML形態學分型，可以將AML分為M0－M7八種類型。有研究表明，M3和M4亞型的患者預后優于其他亞型，而AML中最常見的(8；12)易位與良好的預后有關，但是其在M5亞型中卻很少見。同時，也有報道顯示M5亞型的患者預后明顯差于其他AML。因此，開發更好的AML治療方法尤為迫切，尤其是針對M5亞型的AML。

嵌合抗原受體T(chimeric antigen receptor T，CAR T)細胞免疫療法是通過賦予T細胞能與腫瘤細胞表面抗原相互識別的抗體，從而避開MHC的限制，誘導T細胞特異性活化，改造過的T細胞相較于天然T細胞能夠更好的識別腫瘤并殺死腫瘤。近幾年，CAR T療法在癌癥治療發明取得了巨大的進展，被認為是最有前景的腫瘤治療方式之一。

目前，CAR T療法在治療ALL中的療效最好，應用也最廣泛。其中靶向CD19的CAR在治療成人和兒童ALL中都取得顯著的療效，緩解率可高達90％。在AML的CAR-T治療中CD123和CD33也取得了不錯的成績，但是這兩個抗原在正常髓細胞中都有表達，難免會對患者產生毒副作用，仍然是目前不可忽視的一個問題。因此找到一個相對安全且療效較佳的靶點至關重要，本領域需要開發新的治療靶點和治療方法。

發明內容

本發明的目的在于提供一種靶向B7-H3的CAR-T細胞及其在急性髓系白血病治療中的應用。

在本發明的第一方面，提供了一種嵌合抗原受體(CAR)，所述嵌合抗原受體的抗原結合結構域(即，scFv)包含重鏈可變區和輕鏈可變區，

SEQ ID NO:6所示的CDR1，

SEQ ID NO:7所示的CDR2，和

SEQ ID NO:8所示的CDR3；

且所述的輕鏈可變區包括以下互補決定區CDR：

SEQ ID NO:9所示的CDR1’，

SEQ ID NO:10所示的CDR2’，和

SEQ ID NO:11所示的CDR3’。

在另一優選例中。所述嵌合抗原受體的抗原結合結構域包括SEQ ID NO:1所示的抗體重鏈可變區，和SEQ ID NO:2所示的抗體輕鏈可變區。

在另一優選例中，所述抗體重鏈可變區和抗體輕鏈可變區通過連接肽相連。

在另一優選例中，所述的抗原結合結構域的結構如下式I或II所示：