[發明專利]通用型多核酸產物檢測膠體金試紙條及其制備方法和應用

在審

• 申請號: 202110030584.7
• 申請日: 2021-01-11
• 公開（公告）號: CN112881672A
• 公開（公告）日: 2021-06-01
• 發明（設計）人: 曹亮;張媛
• 申請（專利權）人: 南京鐘鼎生物技術有限公司;南京華鼎生物科技有限公司
• 主分類號: G01N33/53
• 分類號: G01N33/53;G01N33/532;G01N33/543;G01N33/558;G01N33/577
• 代理公司: 北京細軟智谷知識產權代理有限責任公司 11471
• 代理人: 劉靜榮

1.通用型多核酸產物檢測膠體金試紙條，其特征在于，所述試紙條包括底板、樣品墊、金標墊、硝酸纖維素膜和吸水墊，所述硝酸纖維素膜上包被有檢測線和質控線，所述檢測線上包被有FITC單克隆抗體、TAMRA單克隆抗體、DIG單克隆抗體或CY5單克隆抗體中的至少兩種，或者所述檢測線上包被有FAM單克隆抗體、TAMRA單克隆抗體、DIG單克隆抗體或CY5單克隆抗體中的至少兩種，所述金標墊上包被有膠體金標記的生物素單克隆抗體。

2.根據權利要求1所述的通用型多核酸產物檢測膠體金試紙條，其特征在于，將包被濃度為0.3mg/mL的FITC單克隆抗體、0.3mg/mL的TAMRA單克隆抗體、0.2mg/mL的DIG抗體單克隆抗體、0.5mg/mL的CY5單克隆抗體或0.3mg/mLFAM單克隆抗體，按1μL/cm的速度噴于硝酸纖維素膜上，作為檢測線。

3.根據權利要求1所述的通用型多核酸產物檢測膠體金試紙條，其特征在于，將0.5mg/mL的羊抗鼠抗體包被于質控線上。

4.根據權利要求1所述的通用型多核酸產物檢測膠體金試紙條，其特征在于，將生物素單克隆抗體加入到金標緩沖液中，加入封閉液，混勻，離心,得到沉淀，將沉淀復溶得到膠體金標記的生物素單克隆抗體。

5.根據權利要求4所述的通用型多核酸產物檢測膠體金試紙條，其特征在于，將膠體金與0.2M碳酸鉀混合得到金標緩沖液，其中，膠體金的金顆粒為40nm。

6.權利要求1所述的通用型多核酸產物檢測膠體金試紙條的制備方法，其特征在于，所述制備方法包括以下步驟：

(1)將生物素單克隆抗體加入到金標緩沖液中，加入封閉液，混勻，離心,得到沉淀，將沉淀復溶得到膠體金標記的生物素單克隆抗體，并負載于基質上，干燥，得到膠體金墊；

(2)將FITC單克隆抗體、TAMRA單克隆抗體、DIG單克隆抗體或CY5單克隆抗體中的至少兩種包被到硝酸纖維素膜上，或者將FAM單克隆抗體、TAMRA單克隆抗體、DIG單克隆抗體或CY5單克隆抗體中的至少兩種包被到硝酸纖維素膜上，作為檢測線；將羊抗鼠抗體包被到硝酸纖維素膜上，做為質控線上；

(3)將膠體金墊、硝酸纖維素膜與底板、樣品墊和吸水墊進行組裝。

7.根據權利要求6所述的通用型多核酸產物檢測膠體金試紙條的制備方法，其特征在于，步驟(2)中，將包被濃度為0.3mg/mL的FITC單克隆抗體、0.3mg/mL的TAMRA單克隆抗體、0.2mg/mL的DIG抗體單克隆抗體、0.5mg/mL的CY5單克隆抗體或0.3mg/mLFAM單克隆抗體，按1μL/cm的速度噴于硝酸纖維素膜上，作為檢測線。

8.根據權利要求6所述的通用型多核酸產物檢測膠體金試紙條的制備方法，其特征在于，將生物素單克隆抗體加入到金標緩沖液中，加入封閉液，混勻，離心,得到沉淀，將沉淀復溶，得到膠體金標記的生物素單克隆抗體。

9.根據權利要求6所述的通用型多核酸產物檢測膠體金試紙條的制備方法，其特征在于，將膠體金與0.2M碳酸鉀混合，得到所述金標緩沖液，其中，膠體金的金顆粒為40nm。

10.根據權利要求8所述的通用型多核酸產物檢測膠體金試紙條的制備方法，其特征在于，所述封閉液為10％的牛血清白蛋白。