[發(fā)明專(zhuān)利]一種離子交換層析介質(zhì)的清洗方法

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• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 202110026707.X
• 申請(qǐng)日: 2021-01-09
• 公開(kāi)（公告）號(hào): CN112774254A
• 公開(kāi)（公告）日: 2021-05-11
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 馬可;朱衛(wèi)華;李爽;胡國(guó)偉;杜琳
• 申請(qǐng)（專(zhuān)利權(quán)）人: 北京智飛綠竹生物制藥有限公司;重慶智飛生物制品股份有限公司;安徽智飛龍科馬生物制藥有限公司
• 主分類(lèi)號(hào): B01D15/42
• 分類(lèi)號(hào): B01D15/42
• 代理公司: 北京華科聯(lián)合專(zhuān)利事務(wù)所(普通合伙) 11130
• 代理人: 王為

1.一種離子交換層析介質(zhì)的清洗方法，其特征在于，包括如下步驟：

(1)先用氯化鈉溶液清洗，再用氫氧化鈉溶液清洗；或者直接用堿鹽混合液清洗，

(2)用酸鹽混合液清洗。

其中，步驟(1)氯化鈉溶液的濃度為0.5～2.0mol/L，

其中，步驟(1)氫氧化鈉溶液的濃度為0.1～2.0mol/L，

其中，步驟(1)堿鹽混合液是指0.5～2.0mol/L氯化鈉、0.1～2.0mol/L氫氧化鈉混合溶液，

其中，步驟(2)酸鹽混合液是指0.5～2.0mol/L氯化鈉、0.5～2.0mol/L醋酸混合溶液。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于，步驟(1)的氯化鈉溶液清洗條件為清洗0.5～2個(gè)柱體積(CV)或與介質(zhì)接觸至少10～30分鐘。

3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于，步驟(1)的氫氧化鈉溶液清洗條件為清洗1～3CV，同時(shí)滿(mǎn)足介質(zhì)接觸至少0.5～2小時(shí)。

4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于，步驟(1)的堿鹽混合液清洗條件為清洗1～3CV，同時(shí)滿(mǎn)足堿鹽混合液與介質(zhì)接觸0.5～2小時(shí)，

步驟(2)的清洗條件為清洗1～2CV，同時(shí)滿(mǎn)足酸鹽混合溶液與介質(zhì)接觸0.5～2小時(shí)。

5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于，包括如下步驟：

(1)用0.5～2.0mol/L氯化鈉溶液清洗層析柱，清洗0.5～2柱體積(CV)，控制流速使氯化鈉溶液與介質(zhì)接觸至少10～30分鐘。

(2)使用0.1～2.0mol/L氫氧化鈉溶液清洗1～3CV，控制流速使氫氧化鈉溶液與介質(zhì)接觸至少0.5～2小時(shí)。

(3)含0.5～2.0mol/L醋酸和0.5～2.0mol/L氯化鈉的酸鹽混合液清洗1～3CV，控制流速使酸鹽混合液與介質(zhì)接觸至少0.5～2小時(shí)。

6.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于，包括如下步驟：

(1)使用含有0.1～2.0mol/L氫氧化鈉和0.5～2.0mol/L氯化鈉的堿鹽混合液清洗1～3CV，控制流速使堿鹽混合液與介質(zhì)接觸至少0.5～2小時(shí)。

(2)使用含0.5～2.0mol/L醋酸和0.5～2.0mol/L氯化鈉的酸鹽混合液清洗1～3CV，控制流速使酸鹽混合液與介質(zhì)接觸至少0.5～2小時(shí)。

7.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于，包括如下步驟：

(1)使用含有1.0mol/L氫氧化鈉和1.0mol/L氯化鈉的堿鹽混合液清洗2CV，控制流速使堿鹽混合液與介質(zhì)接觸至少1小時(shí)。

(2)使用含1.0mol/L醋酸和1.0mol/L氯化鈉的酸鹽混合液清洗1CV，控制流速使酸鹽混合液與介質(zhì)接觸至少1小時(shí)。

8.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于：層析介質(zhì)為弱陰離子交換介質(zhì)DEAE。

9.一種檢測(cè)清洗效果的檢測(cè)方法，其特征在于，在權(quán)利要求1清洗方法后對(duì)介質(zhì)進(jìn)行清潔效果檢測(cè)，包括如下步驟：

(1)用0.1mol/L氫氧化鈉溶液流洗1～2CV，

(2)用pH值為3～5的0.05～0.2mol/L磷酸鹽緩沖液平衡層析柱，打開(kāi)紫外檢測(cè)280nm、260nm和206nm，檢測(cè)電導(dǎo)率穩(wěn)定后，再流洗5～10CV，檢測(cè)紫外280nm、260nm和206nm，以確定清洗效果。

10.根據(jù)權(quán)利要求書(shū)1～9任意一項(xiàng)所述的方法在細(xì)菌莢膜多糖純化中應(yīng)用。