[發明專利]一種STC-1的LAMP檢測方法、試劑盒及在MRD診斷中的應用在審
| 申請號: | 202110023888.0 | 申請日: | 2021-01-08 |
| 公開(公告)號: | CN112725445A | 公開(公告)日: | 2021-04-30 |
| 發明(設計)人: | 姜國勝;張丹鳳;王希娣;任海山;朱洪靜;陳梅英 | 申請(專利權)人: | 山東科碩生物技術有限公司 |
| 主分類號: | C12Q1/6886 | 分類號: | C12Q1/6886;C12Q1/6844;C12N15/11 |
| 代理公司: | 濟南圣達知識產權代理有限公司 37221 | 代理人: | 李箏 |
| 地址: | 250132 山東省濟南市歷城*** | 國省代碼: | 山東;37 |
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| 摘要: | |||
| 搜索關鍵詞: | 一種 stc lamp 檢測 方法 試劑盒 mrd 診斷 中的 應用 | ||
1.具有如下序列的引物組合:
F3:GAAGCCTGCTGGAATGTGAT(SEQ ID NO:1);
B3:TGATGTGGGAGGGAGAGTC(SEQ ID NO:2);
FIP:GTCTGCAGGATGTGGAAGAGGC-ATCAGAGACAGCCTGATGGA(SEQ ID NO:3);
BIP:CCAAACACACCCACGAGCTGA-GAGGTTCCTGAGGAGGACTT(SEQ ID NO:4)。
2.一種STC-1的LAMP檢測方法,其特征在于,所述檢測方法采用權利要求1所述引物組合。
3.如權利要求2所述STC-1的LAMP檢測方法,其特征在于,所述待測樣品為組織樣品或血液樣本;優選的,所述待測樣本為抗凝外周血或骨髓細胞。
4.如權利要求2所述STC-1的LAMP檢測方法,其特征在于,所述檢測方法步驟如下:提取待測樣品中的基因組總RNA加入LAMP反應體系中在50~70℃反應30-60min。
5.如權利要求4所述STC-1的LAMP檢測方法,其特征在于,基因組總RNA提取方法包括細胞裂解、依次通過試劑對細胞裂解液中的RNA進行提取;
或,所述LAMP反應體系中包括Bst聚合酶、LAMP反應緩沖液、陽性對照、陰性對照或模板RNA。
6.如權利要求2所述STC-1的LAMP檢測方法,其特征在于,所述檢測方法通過肉眼觀察判斷陰性或陽性結果。
7.如權利要求6所述STC-1的LAMP檢測方法,其特征在于,所述陰性結果繼續保溫延長至80~100min,觀察是否改變。
8.一種STC-1的檢測試劑盒,其特征在于,所述檢測試劑盒中,包括權利要求1所述引物組合。
9.如權利要求8所述STC-1的檢測試劑盒,其特征在于,所述檢測試劑盒中,還包括基因組總RNA抽提試劑、LAMP反應體系;或,所述檢測試劑盒的使用方法包括權利要求2-7任一項所述STC-1的LAMP檢測方法的步驟。
10.權利要求7-9任一項所述STC-1檢測試劑盒作為白血病微小殘留病的診斷試劑盒的應用。
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