[發(fā)明專利]一種alpha-L-鼠李糖苷酶、其制備方法及應用在審
| 申請?zhí)枺?/td> | 202110019048.7 | 申請日： | 2021-01-07 |
| 公開（公告）號： | CN113584001A | 公開（公告）日： | 2021-11-02 |
| 發(fā)明（設計）人： | 袁其朋;程磊雨 | 申請（專利權(quán)）人： | 北京化工大學 |
| 主分類號： | C12N9/24 | 分類號： | C12N9/24;C12N15/56;C12N15/81;C12N1/19;C12P19/60;C12P19/14;C12R1/84;C12R1/645 |
| 代理公司： | 北京國林貿(mào)知識產(chǎn)權(quán)代理有限公司 11001 | 代理人： | 李瑾;李連生 |
| 地址： | 100029 *** | 國省代碼： | 北京;11 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關(guān)鍵詞： | 一種 alpha 糖苷酶 制備 方法 應用 | ||
1.一種alpha-L-鼠李糖苷酶，其特征在于，其氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示，或為將SEQ ID NO.1經(jīng)過一個或幾個氨基酸殘基的取代和/或缺失和/或添加而形成的有alpha-L-鼠李糖苷酶活性的蛋白質(zhì)。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述alpha-L-鼠李糖苷酶，其特征在于，其氨基酸序列如SEQ IDNO.1所示，或為將SEQ ID NO.1經(jīng)過一個或幾個氨基酸殘基的取代和/或缺失和/或添加而形成的與SEQ ID NO.1氨基酸序列至少有60%序列相似性有alpha-L-鼠李糖苷酶活性的蛋白質(zhì)。
3.一種核苷酸序列，其特征在于，編碼權(quán)利要求1~2中任意一項所述的alpha-L-鼠李糖苷酶的氨基酸序列或為如SEQ ID NO. 2所示的核苷酸序列。
4.一種重組載體，其特征在于，包含權(quán)利要求3所述的核苷酸序列或者包含如SEQ IDNO. 2所示的核苷酸序列。
5.一種宿主細胞，其特征在于，包含權(quán)利要求4所述的重組載體或者基因組中整合有如SEQ ID NO. 2所示的核苷酸序列。
6.一種alpha-L-鼠李糖苷酶的制備方法，其特征在于，采用權(quán)利要求5所述的宿主細胞生產(chǎn)。
7.權(quán)利要求1~2中任意一項所述的alpha-L-鼠李糖苷酶的制備方法，其特征在于：由藍狀菌發(fā)酵生產(chǎn)。
8.根據(jù)權(quán)利要求7所述的alpha-L-鼠李糖苷酶的制備方法，其特征在于：通過籃狀菌固體發(fā)酵獲得粗酶液，并將所述粗酶液分別通過硫酸銨沉淀、DEAE柱純化以及分子篩層析獲得所述alpha-L-鼠李糖苷酶。
9.權(quán)利要求1~2中任意一項所述的alpha-L-鼠李糖苷酶的應用，其特征在于：應用于特異性水解朝藿定C外側(cè)鼠李糖苷鍵、淫羊藿素雙鼠李糖苷C3外側(cè)鼠李糖苷鍵、蘆丁鼠李糖苷鍵、新橙皮苷鼠李糖苷鍵和柚皮苷鼠李糖鍵。
10.權(quán)利要求1~2中任意一項所述的alpha-L-鼠李糖苷酶應用，其特征在于：應用于制備寶霍苷I。
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