[發(fā)明專(zhuān)利]一種防控鵝星狀病毒復(fù)合佐劑滅活疫苗的制備方法

有效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 202110014104.8
• 申請(qǐng)日: 2021-01-06
• 公開(kāi)（公告）號(hào): CN112675299B
• 公開(kāi)（公告）日: 2023-10-20
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 李山峰;張?jiān)?/a>;王東升;張洪楠;高亞?wèn)|;尹建華
• 申請(qǐng)（專(zhuān)利權(quán)）人: 黑龍江省百洲生物工程有限公司
• 主分類(lèi)號(hào): A61K39/39
• 分類(lèi)號(hào): A61K39/39;A61K39/12;A61P31/14;A61P19/06;C12N7/00;C12N7/06;C12R1/93
• 代理公司: 北京慕達(dá)星云知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理事務(wù)所(特殊普通合伙) 11465
• 代理人: 王敏

1.一種防控鵝星狀病毒復(fù)合佐劑滅活疫苗的制備方法，其特征在于，具體步驟如下：

(1)將黃芪甲苷、CPG核酸、維生素A、維生素E按比例添加到滅活鵝星狀病毒液中，添加吐溫-80，搖勻后添加25％w/v蜂膠乙醇溶液，搖勻，獲得水相；每毫升水相中包含黃芪甲苷100μg-200μg，CPG核酸10μg-1mg，維生素A10mg-30mg，維生素E10mg-30mg；所述水相中Tween-80的占比為4％-6％；所述水相中25％w/v蜂膠乙醇溶液的占比為5％-20％；

(2)將白油、硬脂酸鋁和司本-80按96：1：4的比例混合，獲得油相；

(3)將步驟(1)獲得的水相和步驟(2)獲得的油相按1：1-1.5混勻乳化，獲得鵝星狀病毒復(fù)合佐劑滅活疫苗。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種防控鵝星狀病毒復(fù)合佐劑滅活疫苗的制備方法，其特征在于，步驟(1)所述滅活鵝星狀病毒液的制備方法如下：將分離鑒定后的鵝星狀病毒按1％比例接種到鵝胚肝細(xì)胞中，增殖培養(yǎng)48-72h，待細(xì)胞病變超過(guò)80％，將細(xì)胞反復(fù)凍融，收取細(xì)胞液，離心除去細(xì)胞碎片，得到上清液；取上清液加入終濃度為0.2％的甲醛，37℃滅活24h。

3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種防控鵝星狀病毒復(fù)合佐劑滅活疫苗的制備方法，其特征在于，步驟(1)所述25％w/v蜂膠乙醇溶液的制備方法如下：取蜂膠按25％w/v溶解到無(wú)水乙醇中，完全溶解后過(guò)濾除雜，得到25％w/v蜂膠乙醇溶液。

4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種防控鵝星狀病毒復(fù)合佐劑滅活疫苗的制備方法，其特征在于，步驟(3)所述混勻方法為：將水相加入到油相中，2000rpm混合15min；乳化方法為：3000r/min乳化30min。