[發明專利]一種防控鵝星狀病毒復合佐劑滅活疫苗的制備方法

有效

• 申請號: 202110014104.8
• 申請日: 2021-01-06
• 公開（公告）號: CN112675299B
• 公開（公告）日: 2023-10-20
• 發明（設計）人: 李山峰;張越;王東升;張洪楠;高亞東;尹建華
• 申請（專利權）人: 黑龍江省百洲生物工程有限公司
• 主分類號: A61K39/39
• 分類號: A61K39/39;A61K39/12;A61P31/14;A61P19/06;C12N7/00;C12N7/06;C12R1/93
• 代理公司: 北京慕達星云知識產權代理事務所(特殊普通合伙) 11465
• 代理人: 王敏

1.一種防控鵝星狀病毒復合佐劑滅活疫苗的制備方法，其特征在于，具體步驟如下：

(1)將黃芪甲苷、CPG核酸、維生素A、維生素E按比例添加到滅活鵝星狀病毒液中，添加吐溫-80，搖勻后添加25％w/v蜂膠乙醇溶液，搖勻，獲得水相；每毫升水相中包含黃芪甲苷100μg-200μg，CPG核酸10μg-1mg，維生素A10mg-30mg，維生素E10mg-30mg；所述水相中Tween-80的占比為4％-6％；所述水相中25％w/v蜂膠乙醇溶液的占比為5％-20％；

(2)將白油、硬脂酸鋁和司本-80按96：1：4的比例混合，獲得油相；

(3)將步驟(1)獲得的水相和步驟(2)獲得的油相按1：1-1.5混勻乳化，獲得鵝星狀病毒復合佐劑滅活疫苗。

2.根據權利要求1所述的一種防控鵝星狀病毒復合佐劑滅活疫苗的制備方法，其特征在于，步驟(1)所述滅活鵝星狀病毒液的制備方法如下：將分離鑒定后的鵝星狀病毒按1％比例接種到鵝胚肝細胞中，增殖培養48-72h，待細胞病變超過80％，將細胞反復凍融，收取細胞液，離心除去細胞碎片，得到上清液；取上清液加入終濃度為0.2％的甲醛，37℃滅活24h。

3.根據權利要求1所述的一種防控鵝星狀病毒復合佐劑滅活疫苗的制備方法，其特征在于，步驟(1)所述25％w/v蜂膠乙醇溶液的制備方法如下：取蜂膠按25％w/v溶解到無水乙醇中，完全溶解后過濾除雜，得到25％w/v蜂膠乙醇溶液。

4.根據權利要求1所述的一種防控鵝星狀病毒復合佐劑滅活疫苗的制備方法，其特征在于，步驟(3)所述混勻方法為：將水相加入到油相中，2000rpm混合15min；乳化方法為：3000r/min乳化30min。