[發明專利]一種通過評估分析物的溶劑效應對親和力實驗的影響來指導SPR檢測前處理的方法有效
| 申請號: | 202110010480.X | 申請日: | 2021-01-06 |
| 公開(公告)號: | CN112683857B | 公開(公告)日: | 2022-10-14 |
| 發明(設計)人: | 單雪蓮;榮乃燕;王卓智 | 申請(專利權)人: | 上海藥明生物醫藥有限公司 |
| 主分類號: | G01N21/552 | 分類號: | G01N21/552;G01N1/28 |
| 代理公司: | 上海浦一知識產權代理有限公司 31211 | 代理人: | 鄭權 |
| 地址: | 201403 上海市奉*** | 國省代碼: | 上海;31 |
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| 摘要: | |||
| 搜索關鍵詞: | 一種 通過 評估 分析 溶劑 效應 親和力 實驗 影響 指導 spr 檢測 處理 方法 | ||
1.一種通過評估分析物的溶劑效應對親和力實驗的影響程度來指導SPR檢測前處理的方法,其特征在于,包括:
1)所述分析物取樣,檢測bulk和R0,其中,bulk是指所述分析物最高工作濃度結合階段時在參比通道產生的信號,且bulk3500RU,R0是指分析物最高工作濃度在結合階段時配體通道扣減參比通道后結合信號值;計算bulk/R0比值;
2)對于高親和力、中親和力的反應,當bulk/R0≤10時,分析物無需換液,直接進行SPR檢測;當10bukl/R050時,根據對于圖譜的要求,決定是否換液;當bulk/R0≥50時,需要先換液再進行SPR檢測;
對于低親和力的反應,當bulk/R0≤10時,分析物無需換液,直接進行SPR檢測;當10bukl/R020時,根據對于圖譜的要求,決定是否換液;當bulk/R0≥20時,需要先換液后再進行SPR檢測;
其中,高親和力是指分析物的相互作用對KD1nM,中親和力是指分析物的相互作用對1nM≤KD≤100nM,低親和力是指分析物的相互作用對KD100nM;
所述對于圖譜的要求是指,在扣減后的圖譜中,在結合階段開始前和結束后是否出現凸起和下凹的小峰;如果不消除圖譜中出現的凸起和下凹的小峰,則分析物無需換液,直接進行SPR檢測;如果要消除圖譜中出現的凸起和下凹的小峰,需要先換液后再進行SPR檢測。
2.如權利要求1所述的方法,其特征在于,所述分析物的溶劑效應是由高折光率添加劑產生,所述高折光率添加劑選自海藻糖、甘露醇、蔗糖、甘油或氨基酸中的任意一種或多種。
3.如權利要求2所述的方法,其特征在于,所述高折光率添加劑為海藻糖。
4.如權利要求2所述的方法,其特征在于,所述高折光率添加劑為甘露醇。
5.如權利要求2所述的方法,其特征在于,所述高折光率添加劑為蔗糖。
6.如權利要求1所述的方法,其特征在于,高親和力的分析物的相互作用對為Trastuzumab-Human HER2。
7.如權利要求1所述的方法,其特征在于,中親和力的分析物的相互作用對為mAb1-Ag1。
8.如權利要求1所述的方法,其特征在于,低親和力的分析物的相互作用對為Rituximab-CD32a(H167)。
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