[發明專利]一種山茱萸籽多糖的分離純化方法在審
| 申請號： | 202110009280.2 | 申請日： | 2021-01-05 |
| 公開（公告）號： | CN112608395A | 公開（公告）日： | 2021-04-06 |
| 發明（設計）人： | 白新鵬;何坤明 | 申請（專利權）人： | 海南大學 |
| 主分類號： | C08B37/00 | 分類號： | C08B37/00 |
| 代理公司： | 海南盛億專利代理事務所(普通合伙) 46005 | 代理人： | 陳景帥 |
| 地址： | 570228 海*** | 國省代碼： | 海南;46 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關鍵詞： | 一種 山茱萸 多糖 分離 純化 方法 | ||
1.一種山茱萸籽多糖的分離純化方法，其特征在于，它包括以下步驟：
S1.脫色：將山茱萸籽粗多糖溶液中加入雙氧水，并調節溶液的pH值至8-9，在35-45℃的水浴中脫色0.5-1.5h，脫色后離心得澄清粗多糖溶液；
S2.脫蛋白：將澄清粗多糖溶液中加入Sevage試劑，劇烈震蕩15-25min后移入分液漏斗中靜置，棄取中間層和下層，多次重復至分液漏斗中無明顯的中間蛋白層；將上層的濃縮多糖溶液用透析袋透析除去鹽類及小分子雜質，得無蛋白的山茱萸籽多糖；
S3.陰離子交換柱層析：采用DEAE-52纖維素柱對無蛋白的山茱萸籽多糖進行分離純化,分別用蒸餾水、0.1mol/L、0.2mol/L、0.3mol/L、0.4mol/L和0.5mol/LNaCl溶液以1.0mL/min的流速逐步洗脫，收集吸收峰洗脫液；
S4.葡聚糖凝膠柱層析：采用Sephadex G-100柱對步驟S3中的吸收峰洗脫液進一步分離純化，用蒸餾水以流速0.4mL/min洗脫，收集吸收峰洗脫液，并將洗脫液后處理得高純度的山茱萸籽多糖。
2.根據權利要求1所述的一種山茱萸籽多糖的分離純化方法，其特征在于，步驟S1中所述雙氧水的質量百分比濃度為30％。
3.根據權利要求1所述的一種山茱萸籽多糖的分離純化方法，其特征在于，步驟S1中用氫氧化鈉調節溶液的pH值。
4.根據權利要求1所述的一種山茱萸籽多糖的分離純化方法，其特征在于，步驟S1中所述離心的轉速為5000-7000r/min，離心時間為3-7min。
5.根據權利要求1所述的一種山茱萸籽多糖的分離純化方法，其特征在于，步驟S2中所述Sevage試劑中氯仿與正丁醇的體積比為4:1。
6.根據權利要求1所述的一種山茱萸籽多糖的分離純化方法，其特征在于，步驟S2中所述透析時間為45-50h，并間隔12h更換一次蒸餾水。
7.根據權利要求1所述的一種山茱萸籽多糖的分離純化方法，其特征在于，步驟S3中所述無蛋白的山茱萸籽多糖溶液的上樣濃度為10mg/mL，上樣體積為5mL，上樣前山茱萸籽多糖溶液過0.45μm的過濾膜。
8.根據權利要求1所述的一種山茱萸籽多糖的分離純化方法，其特征在于，步驟S4中所述洗脫液的上樣濃度為10mg/mL，上樣體積為4mL。
9.根據權利要求1所述的一種山茱萸籽多糖的分離純化方法，其特征在于，步驟S4中所述后處理包括濃縮、透析和凍干。
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