[發明專利]7,8-二甲氧基-1,3-二氫-2H-3-苯并氮雜卓-2-酮中有關物質的檢測方法

有效

• 申請號: 202110007617.6
• 申請日: 2021-01-05
• 公開（公告）號: CN114324715B
• 公開（公告）日: 2023-06-02
• 發明（設計）人: 夏兵;王仕偉;王海霞
• 申請（專利權）人: 海南鑫開源醫藥科技有限公司
• 主分類號: G01N30/88
• 分類號: G01N30/88
• 代理公司: 北京集佳知識產權代理有限公司 11227
• 代理人: 豆貝貝

1.7,8-二甲氧基-1,3-二氫-2H-3-苯并氮雜卓-2-酮中有關物質的檢測方法，其特征在于，包括以下步驟：

a）將7,8-二甲氧基-1,3-二氫-2H-3-苯并氮雜卓-2-酮樣品與流動相A混合，得到供試品溶液；

b）將雜質A、雜質B與流動相A混合，得到對照品溶液；

c）將7,8-二甲氧基-1,3-二氫-2H-3-苯并氮雜卓-2-酮樣品、對照品貯備液與流動相A混合，得到混合溶液；

所述對照品貯備液為雜質A、雜質B與流動相A的混合液；

d）將所述供試品溶液、對照品溶液和混合溶液，分別注入高效色譜儀中進行HPLC檢測，分別得到上述3種溶液的HPLC色譜圖，再根據外標法，獲得7,8-二甲氧基-1,3-二氫-2H-3-苯并氮雜卓-2-酮樣品中的雜質含量；

所述HPLC檢測的色譜條件為：采用C18色譜柱，柱溫為25~35℃，流動相的流速為0.9~1.1mL/min；以磷酸二氫鉀、三乙胺與乙腈的混合液為流動相A，乙腈為流動相B；

所述HPLC檢測中，梯度洗脫程序為：0~40min，流動相A從100%降至75%；40~50min，流動相A為75%；50~52min，流動相A從75%升至100%；52~60min，流動相A為100%；

所述雜質A為3,4-二甲氧基苯乙酸，雜質B為N-(2,2-二甲氧基乙基)-3,4-二甲氧基苯基乙酰胺；

所述步驟a）、步驟b）和步驟c）沒有順序限制。

2.根據權利要求1所述的檢測方法，其特征在于，所述流動相A的配制過程包括：

S1、將磷酸二氫鉀溶液與三乙胺混合，得到磷酸鹽溶液；

S2、將所述磷酸鹽溶液與乙腈混合，得到流動相A；

所述磷酸二氫鉀溶液為磷酸二氫鉀的水溶液；所述磷酸二氫鉀溶液的濃度為0.02mol/L；

所述三乙胺在所述磷酸鹽溶液中的質量百分含量為0.1%；

所述磷酸鹽溶液與乙腈的體積比為（80~90）∶（20~10）。

3.根據權利要求2所述的檢測方法，其特征在于，所述步驟S2中，將所述磷酸鹽溶液用磷酸調節pH至4.5后，再與乙腈混合。

4.根據權利要求1所述的檢測方法，其特征在于，所述步驟a）中，7,8-二甲氧基-1,3-二氫-2H-3-苯并氮雜卓-2-酮樣品與流動相A的用量比為（0.02~1）g∶1L；

所述步驟b）中，所述雜質A及雜質B的總質量與流動相A的用量比為（0.0001~0.01）g∶1L；其中，雜質A與雜質B的質量比為1∶1；

所述步驟c）中，所述對照品貯備液中，雜質A及雜質B的總質量與流動相的用量比為（0.001~0.1）g∶1L；其中，雜質A與雜質B的質量比為1∶1。

5.根據權利要求1所述的檢測方法，其特征在于，所述C18色譜柱為YMC-Triart?C18色譜柱。

6.根據權利要求1或5所述的檢測方法，其特征在于，所述C18色譜柱的尺寸為：長250mm，內徑4.6mm，填充料粒徑為5μm；

所述HPLC檢測的檢測波長為230nm。

7.根據權利要求4所述的檢測方法，其特征在于，所述步驟a）中，7,8-二甲氧基-1,3-二氫-2H-3-苯并氮雜卓-2-酮樣品與流動相A的用量比為0.2g∶1L；

所述步驟b）中，所述雜質A及雜質B的總質量與流動相A的用量比為0.001g∶1L；

所述步驟c）中，所述對照品貯備液中，雜質A及雜質B的總質量與流動相的用量比為0.01g∶1L。

8.根據權利要求1所述的檢測方法，其特征在于，所述柱溫為30℃；

所述流動相的流速為1mL/min。

9.根據權利要求2所述的檢測方法，其特征在于，所述磷酸鹽溶液與乙腈的體積比為85∶15。