[發(fā)明專(zhuān)利]一種用于DNA聚合酶識(shí)別特異性的緩沖液及其應(yīng)用

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• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 202110007524.3
• 申請(qǐng)日: 2021-01-05
• 公開(kāi)（公告）號(hào): CN112899353A
• 公開(kāi)（公告）日: 2021-06-04
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 尚午;王友祥;楊志劼
• 申請(qǐng)（專(zhuān)利權(quán)）人: 南京普濟(jì)生物有限公司
• 主分類(lèi)號(hào): C12Q1/686
• 分類(lèi)號(hào): C12Q1/686;C12N9/12
• 代理公司: 暫無(wú)信息
• 代理人: 暫無(wú)信息

1.一種用于DNA聚合酶識(shí)別特異性的緩沖溶液，其特征在于，所述緩沖溶液包括少于四種堿基類(lèi)型的dNTPs或少于四種堿基類(lèi)型的dNTPs的類(lèi)似物。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的緩沖溶液，其特征在于，所述的緩沖溶液包括DNA聚合酶，所述DNA聚合酶包含SEQ ID NO：1所示的氨基酸序列。

3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的緩沖溶液，其特征在于，所述的緩沖溶液包括DNA聚合酶，所述的DNA聚合酶蛋白序列包含在一個(gè)或多個(gè)位置發(fā)生氨基酸取代的SEQ ID NO：1所示的氨基酸序列 ；其中，所述一個(gè)或多個(gè)位置選自SEQ ID No:1所示的氨基酸序列中第6位、第8位、第10位、第104位、第205位或其任意組合。

4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的緩沖溶液，其特征在于，所述的緩沖溶液包括包括DNA聚合酶，所述的DNA聚合酶蛋白序列包含在多個(gè)位置發(fā)生氨基酸取代的SEQ ID NO：1所示的氨基酸序列 ，其中，所述多個(gè)位置選自SEQ ID No:1所示的氨基酸序列中第6位、第8位、第10位、第104位和第205位全部發(fā)生氨基酸取代。

5.根據(jù)權(quán)利要求4所述的緩沖溶液，其特征在于，SEQ ID No:1所示的氨基酸序列的第6位的氨基酸取代為脯氨酸、甘氨酸、羥脯氨酸、絲氨酸或蘇氨酸，和/或第8位的氨基酸取代為異亮氨酸、亮氨酸、纈氨酸、甲硫氨酸、丙氨酸、苯丙氨酸或正亮氨酸取代賴(lài)氨酸，和/或第10位的氨基酸取代為蘇氨酸或絲氨酸，和/或第104位的氨基酸取代為甘氨酸或脯氨酸，和/或第205位的氨基酸取代為酪氨酸、色氨酸、苯丙氨酸、或蘇氨酸。

6.根據(jù)權(quán)利要求4所述的緩沖溶液，其特征在于，所述的DNA聚合酶包含如SEQ ID No:2所示的氨基酸序列，或由如SEQ ID No:2所示的氨基酸序列組成。

7.根據(jù)權(quán)利要求2至6任一權(quán)項(xiàng)所述的緩沖溶液，其特征在于，所述DNA聚合酶只識(shí)別選自堿基A、T、C和G中的三種堿基構(gòu)成的核酸序列。

8.一種識(shí)別特異性DNA聚合酶，其特征在于，所述識(shí)別特異性DNA聚合酶在應(yīng)用過(guò)程中，采用了權(quán)利要求1至6任一權(quán)項(xiàng)所述的緩沖溶液。

9.根據(jù)權(quán)利要求8所述識(shí)別特異性DNA聚合酶，其特征在于，所述DNA聚合酶只識(shí)別選自堿基A、T、C和G中的三種堿基構(gòu)成的核酸序列。

10.一種權(quán)利要求1至6任一權(quán)項(xiàng)所述的緩沖溶液、或權(quán)利要求8或9所述識(shí)別特異性DNA聚合酶在生物或醫(yī)學(xué)領(lǐng)域的應(yīng)用。