[發明專利]補骨脂藥材中18種化學成分含量的測定方法

在審

• 申請號: 202110005948.6
• 申請日: 2021-01-05
• 公開（公告）號: CN112816594A
• 公開（公告）日: 2021-05-18
• 發明（設計）人: 張玥;陳夢穎;周昆;于英莉;宋蕾;楊莉;成麗媛
• 申請（專利權）人: 天津中醫藥大學
• 主分類號: G01N30/02
• 分類號: G01N30/02;G01N30/06;G01N30/34;G01N30/36;G01N30/72;G01N30/86
• 代理公司: 天津創信方達專利代理事務所(普通合伙) 12247
• 代理人: 李京京

1.補骨脂藥材中18種化學成分含量的測定方法，其特征在于，采用UHPLC-MS/MS方法，同時測定補骨脂藥材中18種化學成分的含量。

2.如權利要求1所述的補骨脂藥材中18種化學成分含量的測定方法，其特征在于，所述18種化學成分包括：1補骨脂苷、2異補骨脂苷、3補骨脂素、4異補骨脂素、5花椒毒素、6 5-甲氧基補骨脂素、7異補骨脂二氫黃酮、8巴庫查爾酮、9新補骨脂異黃酮、10補骨脂甲素、11補骨脂寧、12補骨脂定、13補骨脂乙素、14補骨脂二氫黃酮甲醚、15corylifol A、16補骨脂查爾酮、17異補骨脂色烯查爾酮、18補骨脂酚。

3.如權利要求1所述的補骨脂藥材中18種化學成分含量的測定方法，其特征在于，包含以下步驟：

步驟一：18種化學成分的標準曲線建立，方法為：分別精密稱定18種化學成分對照品溶于甲醇，配置成具有已知濃度的各對照品儲備溶液，混合，用甲醇稀釋，配置成分別具有已知濃度的18種化學成分的對照品混合儲備液，然后用體積分數為70-100％的甲醇將所述對照品混合儲備液稀釋成一系列分別具有不同已知濃度的18種化學成分的對照品混合溶液，將V1體積的各濃度的對照品混合溶液分別注入超高效液相色譜-質譜聯用儀中，獲得對照品在不同濃度下的多反應離子監測色譜圖，然后以各對照品的色譜圖峰面積Y為坐標軸，各對照品的濃度X為橫坐標，通過線性回歸運算得到各化學成分的標準曲線；

步驟二：補骨脂藥材中18種化學成分的多反應離子監測色譜圖的獲得，方法為：將質量M的補骨脂藥材粉碎，用體積分數60％的甲醇溶解至體積V2，超聲提取45分鐘，提取液過濾膜后作為供試品溶液，然后取體積V1供試品溶液注入超高效液相色皮-質譜聯用儀中，獲得補骨脂藥材中各化學成分的多反應離子監測色譜圖；

步驟三：補骨脂藥材中18種化學成分的含量的確定，方法為：根據補骨脂藥材中各化學成分的多反應離子色譜圖的峰面積，以及各化學成分的標注曲線，確定補骨脂提取物中各化學成分的含量。

4.如權利要求1所述的補骨脂藥材中18種化學成分含量的測定方法，其特征在于，所述確定補骨脂提取物中各化學成分的含量，包括：從各化學成分的標準曲線中分別確定補骨脂藥材中各化學成分的峰面積對應的濃度C濃，并按照下列公式分別計算出供試品中18種化學成分含量；

5.如權利要求1所述的補骨脂藥材中18種化學成分含量的測定方法，其特征在于，通過線性回歸運算得到各化學成分的標準曲線，具體為：采用加權最小二乘法進行線性回歸運算得到標準曲線，權重系數為1/X。

6.如權利要求1所述的補骨脂藥材中18種化學成分含量的測定方法，其特征在于，預設的色譜條件包括：色譜柱為十八烷基硅烷鍵合硅膠的固定相；流動相：A相為水，B相為乙腈；柱溫：40℃；

流速：0.2mL/分鐘；進樣量3μL；采用梯度洗脫方法，洗脫程序為：0-2min，5-12％B；2-3min，12-20％B；3-7min，20–36％B；7–9min，36％B；9–11min，36–58％B；11–15min，58-78％B；15-16min，78-5％；16-20min，5％B。

7.如權利要求1所述的補骨脂藥材中18種化學成分含量的測定方法，特征在于，預設的質譜條件包括：

離子化方式：電噴霧離子化；多反應離子監測模式：正離子掃描和負離掃描；干燥氣體溫度：500℃；干燥氣體流速10L/min；噴霧氣壓力10psi；干燥氣體和霧化氣體：氮氣；離子化方式為電噴霧離子化。

8.如權利要求1所述的補骨脂藥材中18種化學成分含量的測定方法，其特征在于，質譜參數如下：