[發明專利]一種囊泡離心保護劑及其應用和離心提取囊泡的方法

有效

• 申請號: 202110005298.5
• 申請日: 2021-01-05
• 公開（公告）號: CN112680397B
• 公開（公告）日: 2023-03-21
• 發明（設計）人: 童雅琪;陳彬;張一
• 申請（專利權）人: 湖北盛齊安生物科技股份有限公司
• 主分類號: C12N5/00
• 分類號: C12N5/00
• 代理公司: 北京隆源天恒知識產權代理有限公司 11473
• 代理人: 吳航

1.一種囊泡離心保護劑在離心提取細胞囊泡或載藥囊泡中的應用，其特征在于，所述囊泡離心保護劑由甘油和羧甲基纖維素鈉組成；其中，在含有細胞囊泡或載藥囊泡的細胞懸液中所述甘油的添加比例為3％wt-7％wt，所述羧甲基纖維素鈉的添加比例為2％wt-8％wt。

2.根據權利要求1所述的應用，其特征在于，在含有所述細胞囊泡或所述載藥囊泡的細胞懸液中所述甘油的添加比例為5％wt，所述羧甲基纖維素鈉的添加比例為4％wt。

3.一種離心提取囊泡的方法，其特征在于，包括以下步驟：

S1、向含有囊泡的細胞懸液中加入如權利要求1-2任一項所述的囊泡離心保護劑在離心提取細胞囊泡或載藥囊泡中的應用中的囊泡離心保護劑，混勻得到混懸液；

S2、將所述混懸液在第一離心力下離心8-13min，然后取上清液在第二離心力下離心0.5-3min，之后取上清液在第三離心力下離心30-90min，沉淀即為囊泡；

其中，所述第一離心力＜所述第二離心力≤所述第三離心力。

4.根據權利要求3所述的離心提取囊泡的方法，其特征在于，所述含有囊泡的細胞懸液為含有細胞囊泡的細胞懸液或含有載藥囊泡的細胞懸液。

5.根據權利要求4所述的離心提取囊泡的方法，其特征在于，所述含有細胞囊泡的細胞懸液的制備方法為：用化學、物理和/或生物方法誘導細胞發生凋亡，得到所述含有細胞囊泡的細胞懸液；

所述含有載藥囊泡的細胞懸液的制備方法為：用化學、物理和/或生物方法誘導細胞發生凋亡，將凋亡細胞與有效量的藥物孵育，得到所述含有載藥囊泡的細胞懸液。

6.根據權利要求3-5任一項所述的離心提取囊泡的方法，其特征在于，所述第一離心力為1500-2500g，所述第二離心力為11000-30000g；所述第三離心力為11000-30000g。

7.根據權利要求6所述的離心提取囊泡的方法，其特征在于，步驟S2中，將所述混懸液在2000g離心力下離心10min，然后取上清液在14000g離心力下離心2min，之后取上清液在28000g離心力下離心30min，沉淀即為囊泡。