[發(fā)明專利]使用斷裂內(nèi)含肽系統(tǒng)的的蛋白質(zhì)純化在審
| 申請(qǐng)?zhí)枺?/td> | 202080080416.2 | 申請(qǐng)日： | 2020-11-20 |
| 公開(kāi)（公告）號(hào)： | CN114698379A | 公開(kāi)（公告）日： | 2022-07-01 |
| 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人： | C·J·塞文斯基;P·倫德貝克;J·奧曼;G·格羅斯曼;S·R·丁 | 申請(qǐng)（專利權(quán)）人： | 思拓凡生物工藝研發(fā)有限公司 |
| 主分類號(hào)： | C12N9/12 | 分類號(hào)： | C12N9/12;C12N15/62 |
| 代理公司： | 中國(guó)專利代理(香港)有限公司 72001 | 代理人： | 黃登高;彭昶 |
| 地址： | 瑞典烏*** | 國(guó)省代碼： | 暫無(wú)信息 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關(guān)鍵詞： | 使用 斷裂 內(nèi)含 系統(tǒng) 蛋白質(zhì) 純化 | ||
1.一種N-內(nèi)含肽變體，其包含天然斷裂內(nèi)含肽的至少一個(gè)氨基酸取代，其中N-內(nèi)含肽蛋白質(zhì)變體序列不包括如從初始催化半胱氨酸測(cè)量的至少位置36中的天冬酰胺(N)，并且其中與天然N-內(nèi)含肽蛋白質(zhì)序列或共有N-內(nèi)含肽序列相比，所述取代的氨基酸提供增加的堿穩(wěn)定性。
2.權(quán)利要求1的N-內(nèi)含肽變體，其中提供增加的堿穩(wěn)定性的所述取代的氨基酸是H或Q。
3. 一種點(diǎn)形念珠藻(
CLSYETEILTVEYGLLPIGKIVEKRIECTVYSVDNNGNIYTQPVAQWHDRGEQEVFEYCLEDGSLIRATKDHKFMTVDGQMLPIDEIFERELDLMRV (SEQ ID NO: 1)，其中所述蛋白質(zhì)變體包含在SEQ ID NO: 1的至少位置36中的天冬酰胺(N)用以下氨基酸進(jìn)行的氨基酸取代：與野生型N-內(nèi)含肽結(jié)構(gòu)域和變體或野生型N-內(nèi)含肽結(jié)構(gòu)域的堿穩(wěn)定性相比，所述氨基酸增加N-內(nèi)含肽蛋白質(zhì)變體的堿穩(wěn)定性。
4.根據(jù)權(quán)利要求3的N-內(nèi)含肽蛋白質(zhì)變體，其中增加堿穩(wěn)定性的所述氨基酸取代是組氨酸(H)或谷氨酰胺(Q)。
5.根據(jù)權(quán)利要求4的N-內(nèi)含肽蛋白質(zhì)變體，其中增加堿穩(wěn)定性的所述氨基酸取代是組氨酸(H)。
6. 一種N-內(nèi)含肽變體序列，其包含：
ALSYDTEILTVEYGFLPIGXIVEEXIEXTVYSVDXXGFVYTQPIAQWHNRGEQEVFEYXLEDGSIIRATXDHXFMTTDGXMLPIDEIFEXGLDLXQV (SEQ ID NO: 2)
其中，
在位置20、35、70、73和95中的X各自獨(dú)立地選自K、R或A；
在位置28中的X是C、A或S；
在位置36中的X是N、H或Q；
在位置25中的X是N或R；
在位置59中的X是D或C；
在位置80中的X是E或Q；和
在位置90中的X是Q、R或K；
并且其中與SEQ ID NO: 1相比，所述堿穩(wěn)定性是增加的。
7.根據(jù)權(quán)利要求6的N-內(nèi)含肽變體序列，其中
在位置20、35、70、73和95中的X是R；
在位置28中的X是A；
在位置36中的X是H；
在位置25中的X是N；
在位置59中的X是D；
在位置80中的X是E；和
在位置90中的X是Q。
8.根據(jù)權(quán)利要求6的N-內(nèi)含肽變體序列，其中
在位置20、35、70、73和95中的X是A；
在位置28中的X是A；
在位置36中的X是H；
在位置25中的X是N；
在位置59中的X是D；
在位置80中的X是E；和
在位置90中的X是Q。
9.根據(jù)權(quán)利要求6的N-內(nèi)含肽變體序列，其中
在位置20、35、70、73和95中的X是K；
在位置28中的X是C；
在位置36中的X是H；
在位置25中的X是N；
在位置59中的X是D；
在位置80中的X是E；和
在位置90中的X是Q。
10.根據(jù)權(quán)利要求6的N-內(nèi)含肽變體序列，其中
在位置20、35、70、73和95中的X是R；
在位置28中的X是A；
在位置36中的X是N；
在位置25中的X是N；
在位置59中的X是D；
在位置80中的X是E；和
在位置90中的X是Q。
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