[發(fā)明專利]用于純化目標(biāo)物質(zhì)的方法

在審

• 申請?zhí)枺?/td>: 202080072140.3
• 申請日: 2020-08-06
• 公開（公告）號: CN114555774A
• 公開（公告）日: 2022-05-27
• 發(fā)明（設(shè)計）人: T·納吉;J·黑格;C·黑斯;A·托平;J·普倫
• 申請（專利權(quán)）人: 富士膠片戴奧辛思生物技術(shù)英國有限公司
• 主分類號: C12M1/00
• 分類號: C12M1/00;C12M1/12;C07K1/34;C07K1/16;C07K1/36;C12N15/10;B01D15/18;B01D15/16;G01N30/46
• 代理公司: 中國專利代理(香港)有限公司 72001
• 代理人: 李進(jìn);李唐

用于純化包含水、目標(biāo)物質(zhì)、雜質(zhì)和任選的細(xì)胞的組合物的方法，所述方法包括步驟(A)和(B)：(A)通過對所述組合物進(jìn)行步驟(Ai)和/或(Aii)來制備液體原料；(Ai)從所述組合物中去除至少一些所述細(xì)胞；(Aii)通過從其中去除水來濃縮所述組合物；和(B)使所述液體原料通過包含至少兩個加工單元的儀器，每個這樣的單元生產(chǎn)含有純化的目標(biāo)物質(zhì)的產(chǎn)物流和任選的包含至少一些所述雜質(zhì)的廢物流，其中每個單元包含規(guī)定的組件(i)至(v)。除了它們包含的設(shè)備之外，單元可以基本上相同，導(dǎo)致在簡單性、成本和操作容易性、較低的操作者錯誤風(fēng)險、較容易維護(hù)和較低的備件庫存方面的優(yōu)點。

本發(fā)明涉及純化包含目標(biāo)物質(zhì)(“TS”)的液體(特別是包含生物分子(例如重組多肽)的液體)的方法。

目標(biāo)物質(zhì)(例如生物分子，尤其是重組多肽和核酸)近年來由于它們在治療應(yīng)用中的潛在用途而引起了許多關(guān)注。在這樣的物質(zhì)可以用于治療應(yīng)用之前，它們通常需要純化以去除宿主細(xì)胞、不需要的蛋白質(zhì)、病毒等。生物分子通常通過培養(yǎng)重組宿主細(xì)胞來生產(chǎn)，所述重組宿主細(xì)胞已經(jīng)被工程化以表達(dá)期望的生物分子。隨后從培養(yǎng)基中回收生物分子，并通過通常包括許多加工操作(有時稱為“單元操作”)的方法來純化。

用于純化生物分子的儀器在本領(lǐng)域中是已知的，并且通常包含許多非常不同的加工單元，其中每個單元進(jìn)行單獨的加工操作。通常，這些單元由不同的制造商提供，這些制造商專門用于進(jìn)行一種特定的加工操作(例如，過濾、色譜法等)的設(shè)備。目前用于生物分子的商業(yè)規(guī)模制造的儀器通常體積非常大，并且需要大量的占地面積和基礎(chǔ)設(shè)施。另外，雖然有時可以對多于一種的加工操作實現(xiàn)加工單元的一些通用性，用于某些單元操作(例如病毒滅活和/或超濾)的單元設(shè)計與例如色譜純化的那些單元設(shè)計顯著不同。這意味著需要更多的空間來容納兩組或更多組加工單元，或者用于各階段的儀器的互操作性和控制非常復(fù)雜。此外，操作者需要對所采用的不同類型的加工單元中的每一個進(jìn)行廣泛訓(xùn)練，因為這些單元彼此如此不同。目前用于純化生物分子的許多加工單元之間缺乏相似性意味著需要大量備件庫存。再進(jìn)一步地，許多單元之間缺乏相似性使得例行維護(hù)變得復(fù)雜，因為工程師需要學(xué)習(xí)如何維修結(jié)構(gòu)非常不同的加工單元。如果在錯誤的階段提供錯誤的、外部制備的加工液體，則需要用于不同的加工操作的不同的加工液體(例如緩沖液、洗脫劑等)的儀器也存在操作者錯誤的巨大風(fēng)險，潛在地存在高價批次的生物分子失敗的風(fēng)險。需要簡化的且更廣泛適用的儀器，其具有較低的操作者錯誤風(fēng)險。

根據(jù)本發(fā)明的第一方面，提供了用于純化包含水、目標(biāo)物質(zhì)、雜質(zhì)和任選的細(xì)胞的組合物的方法，所述方法包括步驟(A)和(B)：

(A)通過對所述組合物進(jìn)行步驟(Ai)和/或(Aii)來制備液體原料：

(Ai)從所述組合物中去除至少一些所述細(xì)胞；

(Aii)通過從其中去除水來濃縮所述組合物；和

(B)使所述液體原料通過包含至少兩個加工單元的儀器，每個這樣的單元生產(chǎn)含有純化的目標(biāo)物質(zhì)的產(chǎn)物流和任選的包含至少一些所述雜質(zhì)的廢物流，其中每個單元包含以下組件(i)至(v)：

(i)用于所述液體原料的入口；

(ii)多個入口流量控制器，其包含兩個或更多個可變流量入口閥，用于由至少兩種其它液體以期望的比率組合來生產(chǎn)生物加工液體；

(iii)用于將所述液體原料與所述生物加工液體組合以生產(chǎn)設(shè)備進(jìn)料和/或用于將所述至少兩種其它液體組合以制備所述生物加工液體的裝置；

(iv)用于對所述液體原料或?qū)λ鲈O(shè)備進(jìn)料進(jìn)行加工操作的設(shè)備，所述設(shè)備包含用于所述設(shè)備進(jìn)料和/或所述液體原料的入口和用于產(chǎn)物流的出口；

(v)用于賦予所述液體原料、所述至少兩種液體、所述生物加工液體、所述設(shè)備進(jìn)料、所述產(chǎn)物流和所述任選的廢物流的流的裝置；

其中：

(I)所述液體原料通過入口(i)進(jìn)料并且在所述裝置(iii)中與所述生物加工液體組合，并隨后通過所述設(shè)備(iv)進(jìn)料或在所述設(shè)備(iv)中與所述生物加工液體組合，在任一情況下，以得到離開所述單元的所述產(chǎn)物流和任選的廢物流；

(II)僅如果所述組合物包含細(xì)胞時進(jìn)行步驟(Ai)；