[發(fā)明專(zhuān)利]用于懸浮培養(yǎng)粘附性細(xì)胞的培養(yǎng)基組合物的制造方法

在審

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 202080048520.3
• 申請(qǐng)日: 2020-07-03
• 公開(kāi)（公告）號(hào): CN114040964A
• 公開(kāi)（公告）日: 2022-02-11
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 畑中大輔;金木達(dá)朗;林壽人
• 申請(qǐng)（專(zhuān)利權(quán)）人: 日產(chǎn)化學(xué)株式會(huì)社
• 主分類(lèi)號(hào): C12N5/02
• 分類(lèi)號(hào): C12N5/02;C12N5/0775
• 代理公司: 北京市金杜律師事務(wù)所 11256
• 代理人: 牛蔚然

1.用于懸浮培養(yǎng)粘附性細(xì)胞的培養(yǎng)基組合物的制造方法，所述方法包括以下步驟：

步驟(i)，使胞外基質(zhì)擔(dān)載于由非水溶性多糖類(lèi)構(gòu)成的納米纖維上，

步驟(ii)，將通過(guò)步驟(i)得到的擔(dān)載胞外基質(zhì)的納米纖維添加于培養(yǎng)基中。

2.如權(quán)利要求1所述的方法，其中，非水溶性多糖類(lèi)為選自由甲殼素、殼聚糖、纖維素、和半纖維素組成的組中的至少一種。

3.如權(quán)利要求1或2所述的方法，其中，胞外基質(zhì)為選自由膠原蛋白、纖連蛋白、玻連蛋白、層粘連蛋白、RGD序列、和鈣粘蛋白組成的組中的至少一種。

4.如權(quán)利要求1～3中任一項(xiàng)所述的方法，其中，納米纖維擔(dān)載胞外基質(zhì)的量為每1g納米纖維0.01～50mg胞外基質(zhì)。

5.如權(quán)利要求1～4中任一項(xiàng)所述的方法，其中，非水溶性多糖類(lèi)為甲殼素。

6.如權(quán)利要求5所述的方法，其中，步驟(ii)中還添加殼聚糖納米纖維。

7.如權(quán)利要求6所述的方法，其中，擔(dān)載胞外基質(zhì)的甲殼素納米纖維和殼聚糖納米纖維的含量比(重量)為擔(dān)載胞外基質(zhì)的甲殼素納米纖維：殼聚糖納米纖維＝1：0.5～20。

8.如權(quán)利要求1～7中任一項(xiàng)所述的方法，其中，胞外基質(zhì)為玻連蛋白。

9.培養(yǎng)基添加用組合物，其包含擔(dān)載胞外基質(zhì)的甲殼素納米纖維和殼聚糖納米纖維。

10.如權(quán)利要求9所述的組合物，其中，胞外基質(zhì)為選自由膠原蛋白、纖連蛋白、玻連蛋白、層粘連蛋白、RGD序列和鈣粘蛋白組成的組中的至少一種。

11.如權(quán)利要求9或10所述的組合物，其中，甲殼素納米纖維擔(dān)載胞外基質(zhì)的量為每1g甲殼素納米纖維0.01～50mg胞外基質(zhì)。

12.如權(quán)利要求9～11中任一項(xiàng)所述的組合物，其中，培養(yǎng)基組合物中所含的擔(dān)載胞外基質(zhì)的甲殼素納米纖維與殼聚糖納米纖維的含量比(重量)為擔(dān)載胞外基質(zhì)的甲殼素納米纖維：殼聚糖納米纖維＝1：0.5～20。

13.如權(quán)利要求9～12中任一項(xiàng)所述的組合物，其中，胞外基質(zhì)為玻連蛋白。

14.粘附性細(xì)胞的懸浮培養(yǎng)用培養(yǎng)基組合物，其包含如權(quán)利要求9～13中任一項(xiàng)所述的組合物。