[發(fā)明專利]細(xì)胞競爭調(diào)控劑

在審

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 202080039611.0
• 申請(qǐng)日: 2020-03-30
• 公開（公告）號(hào): CN113939316A
• 公開（公告）日: 2022-01-14
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 丸山剛
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 學(xué)校法人早稻田大學(xué)
• 主分類號(hào): A61K45/00
• 分類號(hào): A61K45/00;A61P21/02;A61P25/00;A61P25/14;A61P25/16;A61P25/28;A61P31/12;A61P35/00;A61P37/06;A61P43/00;C07K14/705;C12N5/077;C12N5/071;C12N5/0
• 代理公司: 中國專利代理(香港)有限公司 72001
• 代理人: 張桂霞;李唐

本發(fā)明提供細(xì)胞競爭調(diào)控劑，該調(diào)控劑含有：包含MHC Ia類的α3結(jié)構(gòu)域的蛋白或抗LILRB3的激動(dòng)劑抗體、或抑制MHC Ia類與LILRB3的結(jié)合的物質(zhì)。

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及用于調(diào)控細(xì)胞競爭的新型調(diào)控劑。

背景技術(shù)

細(xì)胞競爭原本是于1975年在果蠅中發(fā)現(xiàn)的(非專利文獻(xiàn)1)，由果蠅研究者進(jìn)行了研究。關(guān)于在哺乳類細(xì)胞中是否也存在同樣的競爭現(xiàn)象，直至最近也未明確，但在2009年本發(fā)明人的小組在世界上首次報(bào)道了哺乳類中也會(huì)產(chǎn)生細(xì)胞競爭(非專利文獻(xiàn)2)，目前已明確了：細(xì)胞競爭是在各種生理/病理過程中產(chǎn)生的、維持細(xì)胞社會(huì)的恒定性(homeostasis)所必需且普遍的現(xiàn)象。另外，根據(jù)最近的研究，關(guān)于在細(xì)胞競爭中成為敗者的細(xì)胞是如何從組織中清除、或其分子機(jī)理，逐漸積累了見解(非專利文獻(xiàn)3)。

現(xiàn)有技術(shù)文獻(xiàn)

非專利文獻(xiàn)

非專利文獻(xiàn)1：Morata, G.等人, Dev. Biol., 1975; 42: 211-221；

非專利文獻(xiàn)2：Hogan, C.等人, Nat Cell Biol. 2009 Apr; 11(4): 460-7；

非專利文獻(xiàn)3：Maruyama T.等人, Curr Opin Cell Biol. 2017; 48: 106-112。

發(fā)明內(nèi)容

發(fā)明所要解決的課題

然而，關(guān)于“基于抗原呈遞的上皮細(xì)胞清除能力的引發(fā)機(jī)制”這種細(xì)胞間的識(shí)別機(jī)制、或細(xì)胞間通訊分子，迄今為止尚未完全明確。因此，本發(fā)明的課題在于：闡明參與哺乳類的細(xì)胞競爭的、擔(dān)負(fù)“基于抗原呈遞的上皮細(xì)胞清除能力的引發(fā)機(jī)制”的分子實(shí)體，提供利用該機(jī)制的細(xì)胞競爭調(diào)控劑、或使用了該調(diào)控劑的細(xì)胞競爭的調(diào)控方法。

如上所述，人體內(nèi)(我們的體內(nèi))產(chǎn)生的癌癥的80%以上來自上皮細(xì)胞。因此，產(chǎn)生了以下的想法：通過將“基于抗原呈遞的上皮細(xì)胞清除能力的引發(fā)機(jī)制”應(yīng)用于醫(yī)療，能否發(fā)展為以“在致癌前去除突變細(xì)胞”的超早期癌癥治療為對(duì)象的預(yù)防性醫(yī)療；另外，即使對(duì)于晚期癌癥，通過利用上述機(jī)制去除癌細(xì)胞，能否也適用于癌癥的治療。為了闡明上述機(jī)制，本發(fā)明人首先著眼于癌基因RasV12，已知通過將其導(dǎo)入至上皮細(xì)胞而促進(jìn)細(xì)胞競爭。將該基因?qū)胫羴碜匀似つw的細(xì)胞株并使RasV12在該細(xì)胞內(nèi)表達(dá)時(shí)，發(fā)現(xiàn)了主要組織相容性復(fù)合物(major histocompatibility complex) (以下，稱為“MHC”。) I類的細(xì)胞膜表達(dá)得到促進(jìn)。從該見解出發(fā)，本發(fā)明人考慮MHC I類(MHC class I)與細(xì)胞競爭是否相關(guān)，使RasV12在已知抑制MHC-I的表達(dá)的TAP1缺失細(xì)胞中表達(dá)時(shí)，顯示出細(xì)胞競爭沒有得到促進(jìn)、即MHC I類的細(xì)胞膜表達(dá)對(duì)細(xì)胞競爭是必要的。接下來，著眼于狗的MHC-I即DLA，在使RasV12導(dǎo)入株缺損各DLA時(shí)，顯示出作為MHC-Ia的DLA88在細(xì)胞競爭中起到必須的作用。因此，即使對(duì)細(xì)胞給予DLA88的全長肽，細(xì)胞競爭也未得到促進(jìn)，但對(duì)細(xì)胞給予由構(gòu)成胞外結(jié)構(gòu)域的3個(gè)結(jié)構(gòu)域中的α3結(jié)構(gòu)域構(gòu)成的肽片段時(shí)，意外地發(fā)現(xiàn)了細(xì)胞競爭得到促進(jìn)、即MHC-Ia的α3結(jié)構(gòu)域?qū)?xì)胞競爭較為重要的新見解。

從上述見解出發(fā)，在MHC I類與其受體的相互作用和細(xì)胞競爭是否相關(guān)的推測下，嘗試確定MHC I類的受體時(shí)，發(fā)現(xiàn)了免疫球蛋白樣受體LILRB3 (白細(xì)胞免疫球蛋白樣受體(leukocyte immunoglobulin-like receptor), 亞家族B, 成員3)作為MHC I類的受體起作用。因此，著眼于LILRB3進(jìn)行研究時(shí)發(fā)現(xiàn)了：(i) 若敲除上皮細(xì)胞膜上的免疫球蛋白樣受體LILRB3 (白細(xì)胞免疫球蛋白樣受體, 亞家族B, 成員3)，則異常細(xì)胞清除能力下降；另外，(ii) 包含LILRB3的D1～D4這4個(gè)免疫球蛋白結(jié)構(gòu)域中的D1-D2結(jié)構(gòu)域的重組蛋白與包含MHC 1a類的α3結(jié)構(gòu)域的重組蛋白結(jié)合；以及(iii) 包含LILRB3的D1-D2結(jié)構(gòu)域的重組蛋白對(duì)基于細(xì)胞競爭的異常細(xì)胞顯示抑制效果。根據(jù)這些見解進(jìn)一步進(jìn)行研究，結(jié)果完成了本發(fā)明。

用于解決課題的手段