[發明專利]抗EphA4抗體

在審

• 申請號: 202080039114.0
• 申請日: 2020-06-29
• 公開（公告）號: CN113906050A
• 公開（公告）日: 2022-01-07
• 發明（設計）人: 井上英二;山田章夫;川勝智生;今井俊夫;出口真紀;中谷亞季
• 申請（專利權）人: 衛材RD管理有限公司
• 主分類號: C07K16/28
• 分類號: C07K16/28;C12N15/13;A61K39/395;A61P25/28
• 代理公司: 北京市金杜律師事務所 11256
• 代理人: 周莎

提供了一種抗EphA4抗體，其可以結合EphA4并增強EphA4的裂解，以及提供了包含作為活性成分的所述抗體的藥物組合物。獲得了一種對EphA4具有結合親和力并可以增強EphA4的裂解的小鼠抗EphA4抗體，并且鑒定出所述小鼠抗EphA4抗體的互補決定區(CDR)的序列。隨后，通過產生所述小鼠抗EphA4抗體的人源化抗體獲得了目的抗EphA4抗體。

技術領域

本發明涉及與EphA4結合的抗體、編碼所述抗體的核酸、包含所述核酸的載體、包含所述載體的細胞、產生所述抗體的方法以及包含所述抗體的藥物組合物。

背景技術

EphA4是受體酪氨酸激酶家族的成員。肝配蛋白A型和B型被稱為EphA4的配體，并且當EphA4與肝配蛋白(肝配蛋白是EphA4的配體)結合時，誘導去黏附信號。迄今為止，已經提出EphA4參與阿爾茨海默病(在下文中也稱為“AD”)的病理(非專利文獻1-4)，并且據報道抑制EphA4與肝配蛋白之間的結合拯救了淀粉樣β(Aβ)_(1-42)低聚物介導的神經傳遞功能障礙(專利文獻1)。在AD中，認為過度磷酸化tau形成的聚集體(神經原纖維纏結)參與神經細胞的死亡(非專利文獻5)，并且還已經報道，抑制tau磷酸化抑制突觸消失的神經變性(非專利文獻6和非專利文獻7)，以及改善記憶缺陷或認知功能障礙(非專利文獻8-11)。有報道表明CDK5的激活是tau磷酸化的原因(非專利文獻12和非專利文獻13)。表達已經在家族性額顳葉癡呆(rTg4510小鼠)中發現的P301L突變的基因修飾小鼠是AD模型小鼠，與AD相似，tau高度磷酸化和tau在神經元細胞中異常積累在小鼠中發現。在rTg4510小鼠中，神經纖維纏結(AD的病理特征)形成并通過腦萎縮和神經元的缺失引起認知功能障礙(非專利文獻14和非專利文獻5)。

EphA4在海馬體或大腦皮層中大量表達，并且其通過基質金屬蛋白酶(MMP)、ADAM(去整合素和金屬蛋白酶)和γ選擇酶被神經活性依賴性地裂解。眾所周知，EphA4的這種裂解反應穩定了棘突，其是神經功能的關鍵結構(非專利文獻15)。據報道，棘突的密度在AD中降低(非專利文獻16)，并且由于還在AD中在NFT階段V和VI證實了EphA4裂解片段的減少，認為EphA4的裂解反應參與AD的病理(非專利文獻17)。

盡管KYL肽和化合物1等被稱為現有的EphA4抑制藥物(專利文獻2、非專利文獻18和非專利文獻19)，但還沒有關于具有增強EphA4的裂解活性的抗體的報道。

引證文獻清單

[專利文獻1]WO 2016/019280 A1

[專利文獻2]WO 2012/156351 A1

[非專利文獻1]Vargas LM等人,PLoS One[公共科學圖書館·綜合].2014年3月21日；9(3)

[非專利文獻2]Fu AK等人,Proc Natl Acad Sci U S A.[美國國家科學院院刊]2014年7月8日；111(27):9959-64

[非專利文獻3]Rosenberger AF等人,Acta Neuropathol Commun.[神經病理學通訊學報]2014年7月16日；2:79

[非專利文獻4]Huang TY等人,J Exp Med.[實驗醫學雜志]2017Dec 4；214(12):3669-3685。

[非專利文獻5]Santa Cruz等人,Science.[科學]2005年7月15日；309(5733):476-81

[非專利文獻6]Seo J等人,J Neurosci.[神經科學雜志]2017年10月11日；37(41):9917-9924

[非專利文獻7]Patrick GN等人,Nature.[科學]1999年12月9日；402(6762):615-22。