[發明專利]用于抑制中樞神經系統中的基因表達的組合物和方法

在審

• 申請號: 202080031480.1
• 申請日: 2020-04-03
• 公開（公告）號: CN113748208A
• 公開（公告）日: 2021-12-03
• 發明（設計）人: B·D·布朗;M·奧斯博恩;W·王
• 申請（專利權）人: 迪克納制藥公司
• 主分類號: C12N15/113
• 分類號: C12N15/113;A61K31/713;A61K9/00;A61P25/00;A61P25/22;A61P25/28
• 代理公司: 中國專利代理(香港)有限公司 72001
• 代理人: 權陸軍;李唐

本公開涉及可用于降低中樞神經系統中的ALDH2或其他靶基因表達的RNA寡核苷酸、組合物和方法。在一些實施方案中，所述寡核苷酸用于治療神經疾病的方法。提供了在中樞神經系統中具有增強的活性的穩定寡核苷酸衍生物。

相關申請的交叉引用

本申請根據美國法典第35篇第119條(e)款要求2019年4月4日提交的美國臨時申請編號62/829,595的權益，所述申請的全部內容以引用的方式并入本文。

技術領域

本申請涉及RNA干擾寡核苷酸用于降解特定靶mRNA的用途，具體地是與神經病狀的治療相關的用途。

序列表的引用

本申請連同序列表一起以電子格式提交。序列表提供為名稱是400930-021WO_ST25.txt的文件，其創建于2020年4月3日，并且大小是128千字節。電子格式的序列表中的信息以引用的方式整體并入本文。

發明背景

RNA干擾(RNAi)是一種涉及多種RNA-蛋白質相互作用的固有細胞過程。當大于19個雙鏈體核苷酸的雙鏈RNA(dsRNA)分子進入細胞時，RNA干擾的基因沉默活性被激活，從而導致相同序列的dsRNA和單鏈RNA(內源性mRNA)兩者的降解。

更具體地，RNA干擾(RNAi)機制在翻譯階段或通過阻礙特定基因的轉錄來抑制或激活基因表達。RNAi靶標包括來自病毒和轉座子的RNA，并且RNAi對表達的抑制在調節發育和基因組維持方面也發揮了作用。RNAi途徑由切丁酶(dicer)啟動，所述切丁酶將長的雙鏈RNA(dsRNA)分子切割成20-25個堿基對的短片段。然后將每個片段的兩條鏈中的一個(稱為引導鏈)并入RNA-誘導沉默復合物(RISC)中。RISC是一種多蛋白復合物，具體地是一種核糖核蛋白，其包含單鏈RNA的一條鏈，即“反義鏈”或“引導鏈”(ssRNA)片段，以將RISC引導至互補mRNA用于后續的內切核酸切割。一旦被發現，RISC中的一種被稱為Argonaute的蛋白質就會激活并切割mRNA。

一般來說，過去使用RNAi技術的困難包括與使用未充分定制的引導鏈以影響特定基因相關的脫靶效應；遞送至多個可能需要靶基因的基因表達的器官系統；以及具有將寡核苷酸靶向肝臟以外的器官系統的能力，在肝臟中肝細胞的特征有助于RNAi技術的攝取和有效性。

就中樞神經系統(“CNS”)的病理而言，目前用于治療神經退行性或炎性CNS病癥的大多數藥物療法靶向位于致病級聯下游的分子。因此，它們的作用通常不是特異性的，并且在疾病調整方面是有限的或根本無效的。其他可增加醫學方法庫的方法是那些專注于調整或控制疾病的不同方法。這些創新的治療策略之一是使用RNAi技術‘沉默’導致或直接促成疾病表型的基因。使用這種治療手段的困難在于識別特定的候選基因、特異性靶向CNS、治療效果的持久性和可能影響其他組織的RNAi形態從CNS中離開。

醛脫氫酶-2(ALDH2)基因編碼一種重要的生物活性酶ALDH2。ALDH2參與醛的代謝和解毒，并且代謝短鏈脂肪醛，并且將乙醛轉化為乙酸，ALDH2在人的肝臟中具有活性。ALDH2已被證明涉及其他生物醛的代謝，如4-羥基壬烯醛、3，4-二羥基苯乙醛和3，4-二羥基苯乙醇醛。最近的研究已表明ALDH2也在CNS中表達，在CNS中ALDH2對心腦血管系統和中樞神經系統發揮保護作用。據報道，ALDH2基因的單核苷酸多態性(SNP)與若干種神經疾病(如神經退行性疾病、認知障礙和焦慮癥)的風險相關聯。去除或抑制CNS中的ALDH2基因阻止或限制活性酶的生物活性，并且相對容易測量。

發明內容