[發(fā)明專利]一種具有抑菌活性的細(xì)菌素及其生產(chǎn)方法及用途

在審

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 202011643864.7
• 申請(qǐng)日: 2020-12-30
• 公開（公告）號(hào): CN112608369A
• 公開（公告）日: 2021-04-06
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 何增國;喬曉妮;孫曉雯;湯偉;唐濤;張軍
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 中國海洋大學(xué);青島海洋生物醫(yī)藥研究院股份有限公司;青島百奧安泰生物科技有限公司
• 主分類號(hào): C07K14/32
• 分類號(hào): C07K14/32;C07K1/36;C07K1/30;C07K1/16;C12P21/00;A61K38/16;A61P31/04;C12N1/20;C12R1/07
• 代理公司: 青島合創(chuàng)知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理事務(wù)所(普通合伙) 37264
• 代理人: 王曉曉

1.一種具有抑菌活性的細(xì)菌素，其特征在于，所述細(xì)菌素的分子量為6094Da。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的細(xì)菌素，其特征在于，所述的細(xì)菌素由彎曲芽孢桿菌代謝合成產(chǎn)生。

3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的細(xì)菌素，其特征在于，所述彎曲芽孢桿菌來源于西太平洋卡羅琳海山。

4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的細(xì)菌素，其特征在于，所述細(xì)菌素采用RP-C8檢測(cè)時(shí)于220nm條件下獲得特征峰或采用C18柱檢測(cè)時(shí)于280nm條件下得到特征峰。

5.權(quán)利要求1所述的細(xì)菌素的生產(chǎn)方法，其特征在于，

(1)發(fā)酵：將彎曲芽孢桿菌接種于培養(yǎng)基中，得到含有細(xì)菌素的發(fā)酵液；

(2)分離：將含細(xì)菌素發(fā)酵液經(jīng)離心，收集上清液；上清液經(jīng)酸沉和/或大孔樹脂吸附洗脫，收集活性組分，真空濃縮；

(3)提取：用60-80％飽和度硫酸銨從活性組分中鹽析提取細(xì)菌素粗提物；

(4)純化，采用物理手段對(duì)細(xì)菌素粗提物進(jìn)行純化，獲得細(xì)菌素。

6.根據(jù)權(quán)利要求5所述的細(xì)菌素的生產(chǎn)方法，其特征在于，所述培養(yǎng)基為LBM培養(yǎng)基，所述通氣發(fā)酵周期為14-120小時(shí)。

7.根據(jù)權(quán)利要求5所述的細(xì)菌素的生產(chǎn)方法，其特征在于，所述大孔樹脂為D4006型、D3520型大孔樹脂。

8.根據(jù)權(quán)利要求4所述的細(xì)菌素的生產(chǎn)方法，其特征在于，所述分離方法為：

(1)將上清液吸附到經(jīng)過預(yù)處理的大孔樹脂中，然后按照從低到高濃度的乙醇進(jìn)行洗脫，分別收集不同濃度的洗脫組分并在40-60℃下濃縮，獲得濃縮液；優(yōu)選的，乙醇的洗脫濃度為40％～90％；

(2)將濃縮液用6M HCl酸化至pH 1.5-5.0，使活性成分在4℃沉淀，用90％乙醇溶解沉淀物。

9.權(quán)利要求1所述的細(xì)菌素在制備預(yù)防和/或治療致病菌制劑中的用途。

10.根據(jù)權(quán)利要求9所述的細(xì)菌素在制備預(yù)防和/或治療致病菌制劑中的用途，其特征在于，所述細(xì)菌素能夠抑制金黃色葡萄球菌、無乳鏈球菌、糞腸球菌、產(chǎn)氣莢膜梭菌。

11.一種用于培養(yǎng)權(quán)利要求1或權(quán)利要求5所述的細(xì)菌素的產(chǎn)生菌的培養(yǎng)基，其特征在于，所述培養(yǎng)基體積占比為酵母粉1-15g/L、氯化鈉1-60g/L、胰蛋白胨1-30g/L、葡萄糖1-50g/L、BG11 10-30g/L。