[發(fā)明專利]一種純化維拉卡肽的方法

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 202011641379.6
• 申請日: 2020-12-31
• 公開（公告）號: CN112552376B
• 公開（公告）日: 2022-11-25
• 發(fā)明（設計）人: 谷海濤;蔣昌威
• 申請（專利權）人: 江蘇諾泰澳賽諾生物制藥股份有限公司
• 主分類號: C07K7/06
• 分類號: C07K7/06;C07K1/20
• 代理公司: 連云港潤知專利代理事務所 32255
• 代理人: 劉喜蓮

本發(fā)明公開了一種固相合成維拉卡肽的純化方法，多肽藥物制備技術領域。該方法先將固相合成的維拉卡肽粗樣溶于水中；粗肽溶液加入等體積的乙腈溶液、飽和氯化鈉溶液析出，所得固體用水溶解后過濾，用C18反相色譜柱，以0.2％鹽酸為A相，乙腈為B相，梯度洗脫得到純度大于99.00％的樣品；樣品用C18反相色譜柱，以50mmol/L氯化銨溶液為A相，乙腈為B相，梯度為5％?5％，完成離子交換，再以0.1％鹽酸水溶液進為A相，乙腈為B相，先梯度平衡，再梯度洗脫得到轉鹽樣品；轉鹽樣品減壓濃縮，冷凍干燥得到維拉卡肽終產品。本發(fā)明方法大大提高了處理量，縮短了生產周期，適合工業(yè)化大規(guī)模生產，提高了產率，降低了生產成本。

技術領域

本發(fā)明涉及多肽藥物制備技術領域，特別涉及一種純化維拉卡肽的方法。

背景技術

繼發(fā)性甲狀旁腺功能亢進(SHPT，簡稱繼發(fā)性甲旁亢)，是指在慢性腎功能不全、腸吸收不良綜合征、Fanconi綜合征和腎小管酸中毒、維生素D缺乏或抵抗以及妊娠、哺乳等情況下，甲狀旁腺長期受到低血鈣、低血鎂或高血磷的刺激而分泌過量的甲狀旁腺激素(PTH)，以提高血鈣、血鎂和降低血磷的一種慢性代償性臨床表現(xiàn)，長期的甲狀旁腺增生最終導致形成功能自主的腺瘤。

維拉卡肽是由KaiPharmaceuticals,Inc.開發(fā)的一種新穎的擬鈣劑(calcimimeticagent)，能夠抑制甲狀旁腺激素的分泌。維拉卡肽可結合并激活甲狀旁腺上的鈣敏感受體，實現(xiàn)甲狀旁腺激素水平的降低。維拉卡肽可以再進行血液透析的同事通過靜脈給藥，這對于每天都需要使用大量藥物的慢性腎病患者來說是一個福音。因此，velcalcetide很有可能超過Sensipar。分析師預期維拉卡肽的年銷售峰值出現(xiàn)在2023年，為10億美元。所以，對維拉卡肽的純化方法的研究具有重要的意義。

發(fā)明內容

本發(fā)明的目的在于解決現(xiàn)有技術一次性處理量較少、步驟繁瑣、損耗過大且得到維拉卡肽純度較低收率較低的技術問題，提供一種新的適用于維拉卡肽的純化方法。

本發(fā)明的技術方案如下：一種純化維拉卡肽的方法，包括以下步驟：

(1)將固相合成的維拉卡肽粗樣溶于水中，得粗液；

(2)取粗肽溶液加入等體積的乙腈溶液，樣品在溶液中析出，再加入等體積的飽和氯化鈉溶液促進樣品析出，過濾得固體；

(3)將濾出的固體用水溶解，過濾，用C18反相色譜柱，以0.2％鹽酸為A相，乙腈為B相，梯度為20％-30％，檢測波長為220nm進行HPLC線性洗脫，得到純度大于99.00％，單雜小于0.1％的樣品；

(4)所得樣品，用C18反相色譜柱，以50mmol/L氯化銨溶液為A相，乙腈為B相，梯度為5％-5％，完成離子交換，再以0.1％鹽酸水溶液進為A相，乙腈為B相，先以5％-5％的梯度平衡，后再以50％-50％的梯度洗脫得到轉鹽樣品；

(5)將轉鹽后的樣品進行減壓濃縮，冷凍，極限真空干燥，得到維拉卡肽終產品。

以上所述的一種純化維拉卡肽的方法，其進一步優(yōu)選的技術方案是：

(1)將固相合成的維拉卡肽粗樣溶于水中，得粗液；

(2)取粗肽溶液加入等體積的乙腈溶液，樣品在溶液中析出，再加入等體積的飽和氯化鈉溶液促進樣品析出，過濾，保留固體；

(3)將濾出的固體用水溶解，經0.45um水系膜過濾后，用C18反相色譜柱，以0.2％鹽酸為A相，乙腈為B相，梯度為20％-30％，時間為60min，檢測波長為220nm進行HPLC線性洗脫，得到純度大于99.00％，單雜小于0.1％的樣品；