[發明專利]一種純化維拉卡肽的方法有效
| 申請號： | 202011641379.6 | 申請日： | 2020-12-31 |
| 公開（公告）號： | CN112552376B | 公開（公告）日： | 2022-11-25 |
| 發明（設計）人： | 谷海濤;蔣昌威 | 申請（專利權）人： | 江蘇諾泰澳賽諾生物制藥股份有限公司 |
| 主分類號： | C07K7/06 | 分類號： | C07K7/06;C07K1/20 |
| 代理公司： | 連云港潤知專利代理事務所 32255 | 代理人： | 劉喜蓮 |
| 地址： | 222000 江蘇省連云*** | 國省代碼： | 江蘇;32 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關鍵詞： | 一種 純化 維拉卡肽 方法 | ||
1.一種純化維拉卡肽的方法，其特征在于，包括以下步驟：
(1)將固相合成的維拉卡肽粗樣溶于水中，得粗液；
(2)取粗肽溶液加入等體積的乙腈溶液，樣品在溶液中析出，再加入等體積的飽和氯化鈉溶液促進樣品析出，過濾得固體；
(3)將濾出的固體用水溶解，過濾，用C18反相色譜柱，以0.2％鹽酸為A相，乙腈為B相，梯度為20％-30％，檢測波長為220nm進行HPLC線性洗脫，得到純度大于99.00％，單雜小于0.1％的樣品；
步驟(3)中的洗脫梯度為：
(4)所得樣品，用C18反相色譜柱，以50mmol/L氯化銨溶液為A1相，乙腈為B相，梯度為5％-5％，完成離子交換，再以0.1％鹽酸水溶液進為A2相，乙腈為B相，先以5％-5％的梯度平衡，后再以50％-50％的梯度洗脫得到轉鹽樣品；
步驟(4)中的洗脫梯度為：
(5)將轉鹽后的樣品進行減壓濃縮，冷凍，極限真空干燥，得到維拉卡肽終產品。
2.根據權利要求1所述的一種純化維拉卡肽的方法，其特征在于，步驟(1)中，維拉卡肽粗樣溶于水中至溶解濃度50g/L。
3.根據權利要求1所述的一種純化維拉卡肽的方法，其特征在于，步驟(5)中，將轉鹽樣品在35±2℃下減壓濃縮，濃度為30g/L，用0.22um有機系濾膜過濾，分裝至凍干盤中，高度1.0-1.2cm，進行冷凍干燥。
4.根據權利要求1或2所述的一種純化維拉卡肽的方法，其特征在于，步驟(5)中，所述的凍干操作步驟如下：
。
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