[發(fā)明專利]一種肥皂莢組織培養(yǎng)再生體系建立的方法

有效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 202011628134.X
• 申請(qǐng)日: 2020-12-30
• 公開(kāi)（公告）號(hào): CN112586357B
• 公開(kāi)（公告）日: 2023-05-23
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 李斌;侯俊;陳杰;周應(yīng)書(shū);畢寧;王彩云;肖艷;周聿
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 畢節(jié)市林業(yè)科學(xué)研究所
• 主分類號(hào): A01H4/00
• 分類號(hào): A01H4/00
• 代理公司: 貴州派騰知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理有限公司 52114
• 代理人: 谷慶紅

本發(fā)明屬于植物無(wú)性繁殖技術(shù)領(lǐng)域，具體涉及一種肥皂莢組織培養(yǎng)再生體系建立的方法；利用組織培養(yǎng)技術(shù)以肥皂莢種子進(jìn)行繁育，在組培前先對(duì)種子進(jìn)行預(yù)處理，使種皮變薄，使得無(wú)菌苗能迅速長(zhǎng)出，縮短培育時(shí)間，增加出苗率。通過(guò)組織培養(yǎng)技術(shù)，在短期內(nèi)即可獲得大量的離體再生植株，保持了母本的優(yōu)良特性，為肥皂莢資源保護(hù)、良種選育以及產(chǎn)業(yè)發(fā)展提供了科技支撐。

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明屬于植物無(wú)性繁殖技術(shù)領(lǐng)域，具體涉及一種肥皂莢組織培養(yǎng)再生體系建立的方法。

背景技術(shù)

肥皂莢(Gymnocladus?chinensis?Baill.)又名肉皂莢、肉皂角、肥豬子(引用(皂莢和肥皂莢))，為豆科肥皂莢屬落葉喬木，廣泛分布于陜西南部、四川、貴州、湖北、湖南、廣東北部、江西、安徽、江蘇南部、浙江、福建等地。生于海拔150-1500米山坡、山腰、雜木林中，樹(shù)種冠形較大，特別喜光，喜溫暖氣候及肥沃土壤，樹(shù)木幼時(shí)生長(zhǎng)較快，不怕強(qiáng)日光，在貧瘠的土壤中生長(zhǎng)緩慢。肥皂莢果富含皂苷、皂素，種子油可作油漆等工業(yè)用油，種仁可食，具有較高的藥用價(jià)值，是食品、保健品、化妝品及洗滌用品的天然原料，也是園林綠化與生態(tài)工程造林的重要樹(shù)種，具有極高的經(jīng)濟(jì)和生態(tài)價(jià)值，是助力脫貧攻堅(jiān)和振興鄉(xiāng)村的朝陽(yáng)產(chǎn)業(yè)之一，也是低效林改造的重要樹(shù)種。肥皂莢莢果長(zhǎng)橢圓形，扁平或肥厚，結(jié)果量少，一個(gè)豆莢內(nèi)只有種子2-4粒，由于豆莢和種皮的特殊生理結(jié)構(gòu)，種子在自然條件下很難發(fā)芽成苗，且種子量少，自然更新十分緩慢。資源量少，群體殘次瀕危，急需收集、保護(hù)和開(kāi)發(fā)利用。目前主要采用播種、扦插和嫁接等傳統(tǒng)方式進(jìn)行育苗，存在長(zhǎng)勢(shì)不好、參差不齊、良種潛力得不到充分表現(xiàn)等缺點(diǎn)，使得目前優(yōu)質(zhì)苗木資源量少。利用組織培養(yǎng)技術(shù)進(jìn)行珍稀瀕危物種和優(yōu)良品系樹(shù)種繁育，具有繁殖育種快、育種周期短、周年生產(chǎn)等特點(diǎn)。目前還沒(méi)有關(guān)于肥皂莢組織培養(yǎng)技術(shù)方面的相關(guān)報(bào)到，本發(fā)明以種子為外植體，通過(guò)試驗(yàn)探索不同濃度激素組合對(duì)肥皂莢愈傷組織誘導(dǎo)、分化、增殖和生根的影響，建立肥皂莢組織培養(yǎng)技術(shù)體系，對(duì)保護(hù)肥皂莢種質(zhì)資源具有重要意義，為肥皂莢的良種選育、優(yōu)良苗木規(guī)模化生產(chǎn)以及產(chǎn)業(yè)發(fā)展奠定基礎(chǔ)。

目前有一些針對(duì)皂莢進(jìn)行組培繁殖的研究，如申請(qǐng)?zhí)枮镃N201610271956.4的專利文件公開(kāi)了一種絨毛皂莢組織培養(yǎng)再生體系的建立方法，其是采用絨毛皂莢種子作為外植體經(jīng)過(guò)消毒、無(wú)菌苗培養(yǎng)、愈傷組織誘導(dǎo)、不定芽增殖、生根培養(yǎng)和馴化移栽進(jìn)行培育的。但其是針對(duì)絨毛皂莢進(jìn)行的研究，絨毛皂莢與肥皂莢不同，肥皂莢果實(shí)為中藥材的一種，且從植物學(xué)分類上便不同。

申請(qǐng)?zhí)枮镃N201811429114.2的專利文件公開(kāi)了一種皂莢組培快繁方法，其是以皂莢樹(shù)樁基部的嫩枝作為外植體，包括消毒、誘導(dǎo)培養(yǎng)、增殖培養(yǎng)、生根培養(yǎng)、煉苗移栽等步驟。但其是采用枝條作為外植體，并且是針對(duì)叢生芽進(jìn)行誘導(dǎo)培養(yǎng)，皂莢與肥皂莢也是兩種不同的植物。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明為解決上述問(wèn)題，提供了一種肥皂莢組織培養(yǎng)再生體系建立的方法。

具體是通過(guò)以下技術(shù)方案來(lái)實(shí)現(xiàn)的：

一種肥皂莢組織培養(yǎng)再生體系建立的方法，包括以下步驟：

1、外植體采集：收集肥皂莢成熟豆莢，取種子。

2、外植體預(yù)處理：

a.采用高錳酸鉀、濃度為7％的稀硫酸溶液和水以3-7％、10-15％、78-87％的質(zhì)量百分比配成處理液；

b.將肥皂莢種子以處理液浸泡2-5min，同時(shí)輔以頻率為30-40W的微波輻射處理。

3、外植體消毒：將采集的肥皂莢種子置于燒杯中用清水沖洗干凈備用，在超凈工作臺(tái)中用75％的酒精浸泡處理50-70s，再用0.1％的升汞浸泡處理17-22min。

4、無(wú)菌苗培養(yǎng)：用無(wú)菌水將消毒后的外植體清洗3-5次后用無(wú)菌濾紙吸干表面的水分接種在MS培養(yǎng)基上，25±1℃進(jìn)行發(fā)芽試驗(yàn)，待培養(yǎng)至無(wú)菌苗長(zhǎng)至3～5cm時(shí)即進(jìn)行下一步。