[發(fā)明專利]一種肥皂莢組織培養(yǎng)再生體系建立的方法

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 202011628134.X
• 申請日: 2020-12-30
• 公開（公告）號: CN112586357B
• 公開（公告）日: 2023-05-23
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 李斌;侯俊;陳杰;周應(yīng)書;畢寧;王彩云;肖艷;周聿
• 申請（專利權(quán)）人: 畢節(jié)市林業(yè)科學(xué)研究所
• 主分類號: A01H4/00
• 分類號: A01H4/00
• 代理公司: 貴州派騰知識產(chǎn)權(quán)代理有限公司 52114
• 代理人: 谷慶紅

1.一種肥皂莢組織培養(yǎng)再生體系建立的方法，包括外植體消毒、無菌苗培養(yǎng)、誘導(dǎo)培養(yǎng)、生根培養(yǎng)；其特征在于，在對外植體消毒前進行預(yù)處理；所述的誘導(dǎo)培養(yǎng)，是采用愈傷組織誘導(dǎo)培養(yǎng)基同時誘導(dǎo)愈傷組織和不定芽，再將不定芽接種在不定芽增殖培養(yǎng)基上進行增殖培養(yǎng)；

所述的預(yù)處理，是將肥皂莢種子先以處理液浸泡2-5min，同時輔以頻率為30-40W的微波輻射處理；

所述的處理液，按質(zhì)量百分?jǐn)?shù)計，其組成為：3-7％的高錳酸鉀、10-15％的濃度為7％的稀硫酸溶液、78-87％的水；

所述的愈傷組織誘導(dǎo)培養(yǎng)基，其組成為：MS+6-BA?1.0～3.0mg/L+TDZ?0.01～0.05mg/L+NAA?0.1～0.5mg/L+0.6-1.2％的瓊脂+2-5％的蔗糖；

所述的不定芽增殖培養(yǎng)基，其組成為：MS+6-BA?0.1～1.0mg/L+NAA?0.01～0.1mg/L+0.6-1.2％的瓊脂+2-5％的蔗糖；

所述的生根誘導(dǎo)培養(yǎng)基，其組成為：1/2MS+IBA?0.1～0.5mg/L+NAA?0.1～0.5mg/L+0.6-1.2％的瓊脂+2-5％的蔗糖。

2.如權(quán)利要求1所述的一種肥皂莢組織培養(yǎng)再生體系建立的方法，其特征在于，包括以下步驟：

a.將采集的肥皂莢種子沖洗干凈后在超凈工作臺中消毒處理，接種在MS培養(yǎng)基上培養(yǎng)無菌苗，得到無菌苗子葉；

b.將步驟a中得到的無菌苗子葉接種在愈傷組織誘導(dǎo)培養(yǎng)基上，同步誘導(dǎo)愈傷組織和不定芽；

c.將不定芽接種在不定芽增殖培養(yǎng)基上進行增殖培養(yǎng)，得到增殖苗；

d.將增殖苗接種在生根誘導(dǎo)培養(yǎng)基上進行生根培養(yǎng)。

3.如權(quán)利要求2所述的一種肥皂莢組織培養(yǎng)再生體系建立的方法，其特征在于，所述的消毒處理，是先用75％的酒精浸泡處理50-70s，再用0.1％的升汞浸泡處理17-22min，用無菌水清洗3-5次，吸干水分即可。

4.如權(quán)利要求1所述的一種肥皂莢組織培養(yǎng)再生體系建立的方法，其特征在于，所述培養(yǎng)基的pH值在5.5-6.0范圍內(nèi)；培養(yǎng)過程中溫度25±1℃，濕度70-80％，光照強度2000-2200lx，每天光照時間12h。