[發明專利]一種突變體及其構建方法和應用

有效

• 申請號: 202011624067.4
• 申請日: 2020-12-30
• 公開（公告）號: CN112626044B
• 公開（公告）日: 2022-08-19
• 發明（設計）人: 馬富強;陸澤林;江晶潔;張藝凡;楊廣宇
• 申請（專利權）人: 中國科學院蘇州生物醫學工程技術研究所
• 主分類號: C12N9/06
• 分類號: C12N9/06;C12N15/53;C12N15/70;C12N15/10;C12N1/21;C12R1/19
• 代理公司: 深圳市科進知識產權代理事務所(普通合伙) 44316
• 代理人: 魏毅宏

1.一種突變體，其特征在于，其氨基酸序列為SEQ ID NO.1上發生下列位點的突變：

G34D；

G34D和S38R；

G34D和Y128R；

G34D和Q332K；

G34D、S38R和Y128R；

G34D、S38R和Q332K；

G34D、Y128R和Q332K；

G34D、S38R、Y128R和Q332K。

2.根據權利要求1所述突變體，其特征在于，所述突變體對應的氨基酸序列分別為SEQID NO.2、SEQ ID NO.6、SEQ ID NO.7、SEQ ID NO.8、SEQ ID NO.12、SEQ ID NO.13、SEQ IDNO.15、SEQ ID NO.16。

3.一種編碼權利要求2所述突變體的基因序列，其特征在于，所述基因序列被配置為SEQ ID NO.17、SEQ ID NO.21、SEQ ID NO.22、SEQ ID NO.23、SEQ ID NO.27、SEQ IDNO.28、SEQ ID NO.30、SEQ ID NO.31中的任一種，其中：

編碼突變位點為G34D的突變體的核酸序列為SEQ ID NO.17；

編碼突變位點為G34D和S38R的突變體的核酸序列為SEQ ID NO.21；

編碼突變位點為G34D和Y128R的突變體的核酸序列為SEQ ID NO.22；

編碼突變位點為G34D和Q332K的突變體的核酸序列為SEQ ID NO.23；

編碼突變位點為G34D、S38R和Y128R的突變體的精氨酸氧化酶突變體的核酸序列為SEQID NO.27；

編碼突變位點為G34D、S38R和Q332K的突變體的精氨酸氧化酶突變體的核酸序列為SEQID NO.28；

編碼突變位點為G34D、Y128R和Q332K的突變體的核酸序列為SEQ ID NO.30；

編碼突變位點為G34D、S38R、Y128R和Q332K的突變體的核酸序列為SEQ ID NO.31。

4.根據權利要求3所述基因序列，其特征在于，所述突變位點G34D的擴增引物對的核酸序列為SEQ ID NO.32和SEQ ID NO.33。

5.根據權利要求3所述基因序列，其特征在于，所述突變位點S38R的擴增引物對的核酸序列為SEQ ID NO.34和SEQ ID NO.35。

6.根據權利要求3所述基因序列，其特征在于，所述突變位點Y128R的擴增引物對的核酸序列為SEQ ID NO.36和SEQ ID NO.37。

7.根據權利要求3所述基因序列，其特征在于，所述突變位點Q332K的擴增引物對的核酸序列為SEQ ID NO.38和SEQ ID NO.39。

8.一種可溶性蛋白，其特征在于，其被配置為包括權利要求1～2任一所述突變體。

9.一種固定化酶，其特征在于，其被配置為包括權利要求1～2任一所述突變體。

10.一種重組工程細胞，其特征在于，其被配置為包括權利要求1～2任一所述突變體的編碼序列。

11.一種重組載體，其特征在于，其被配置為包括權利要求1～2任一所述突變體的編碼序列。

12.權利要求1～2任一所述突變體、權利要求8所述的可溶性蛋白、權利要求9所述的固定化酶、權利要求10所述的重組工程細胞或權利要求11所述的重組載體在催化氧化L-精氨酸中的應用。