[發明專利]抗病毒藥物臨床研究血漿樣本中替諾福韋艾拉酚胺及代謝物替諾福韋濃度的生物分析方法

在審

• 申請號: 202011622562.1
• 申請日: 2020-12-30
• 公開（公告）號: CN112834670A
• 公開（公告）日: 2021-05-25
• 發明（設計）人: 陳云輝;鐘勘;肖濤;楊勇;史中杰;溫鳳嬌;劉旭凌;周林芳;姜金方;周茂金
• 申請（專利權）人: 蘇州海科醫藥技術有限公司
• 主分類號: G01N30/72
• 分類號: G01N30/72;G01N30/02;G01N30/06
• 代理公司: 北京同輝知識產權代理事務所(普通合伙) 11357
• 代理人: 劉洪勛

1.一種抗病毒藥物臨床研究血漿樣本中替諾福韋艾拉酚胺及代謝物替諾福韋濃度的生物分析方法，其特征在于，包括以下步驟：

預處理，在96孔板中加入血漿，加入內標溶液，加入甲醇:乙腈的體積比為50:50，v/v，渦流及離心后取上清液到另一干凈96孔板中，加入含0.1％甲酸水溶液，渦流混勻，進樣20.0μL；

色譜，將待測樣品液相色譜分離，采用Eclipse Plus C₁₈色譜柱，梯度洗脫，流動相A為含0.1％甲酸和2mM醋酸銨水溶液，流動相B為乙腈，色譜運行時間5.3min；

質譜，采用電噴霧離子源，正離子檢測，噴射電壓5500V，氣體1(Gas1)60psi，氣體2(Gas2)60psi，氣簾氣體(Curtain Gas)35psi，離子源溫度550℃，碰撞誘導解離9psi，駐留時間100ms，替諾福韋艾拉酚胺定量分析離子對m/z477.2→346.1，碰撞能量(CE)60eV，去簇電壓(DP)80V，替諾福韋定量分析離子對288.1→176.1，碰撞能量(CE)35eV，去簇電壓(DP)80V，替諾福韋艾拉酚胺-d5定量分析離子對482.3→351.2，碰撞能量(CE)60eV，去簇電壓(DP)80V，替諾福韋-d7定量分析離子對295.2→183.1，碰撞能量(CE)35eV，去簇電壓(DP)80V。

2.根據權利要求1所述的一種抗病毒藥物臨床研究血漿樣本中替諾福韋艾拉酚胺及代謝物替諾福韋濃度的生物分析方法，其特征在于：所述預處理，取100μL血漿樣品，加入50.0μL內標溶液，加入300μL甲醇:乙腈(50:50，v/v)，渦流及離心后取100μL上清液到另一干凈96孔板中，加入300μL含0.1％甲酸水溶液，渦流混勻。

3.根據權利要求1或2所述的一種抗病毒藥物臨床研究血漿樣本中替諾福韋艾拉酚胺及代謝物替諾福韋濃度的生物分析方法，其特征在于：所述內標溶液為替諾福韋艾拉酚胺-d5和替諾福韋-d7溶液。