[發明專利]一種通過特征圖譜判斷燀制工藝的方法

在審

• 申請號: 202011622323.6
• 申請日: 2020-12-30
• 公開（公告）號: CN112557554A
• 公開（公告）日: 2021-03-26
• 發明（設計）人: 劉青;林碧珊;區淑蘊;曾杉;胡梅;張文芳;肖炯昌;高永堅;湯春花
• 申請（專利權）人: 國藥集團廣東環球制藥有限公司
• 主分類號: G01N30/02
• 分類號: G01N30/02;G01N30/86
• 代理公司: 佛山市禾才知識產權代理有限公司 44379
• 代理人: 單蘊倩;朱培祺

本發明公開了一種通過特征圖譜判斷燀制工藝的方法，其特征在于，包括以下步驟：(1)制備以燀制工藝所得飲片的供試品溶液；(2)對供試品溶液以高效液相色譜儀進行檢測，以甲醇為流動相A，以0.1％磷酸溶液為流動相B，得到特征圖譜；(3)分析特征圖譜中苦杏仁苷峰面積，以苦杏仁苷峰面積與總峰面積的比值判斷所述飲片是否合格，若飲片合格則燀制工藝徹底，若飲片不合格則燀制工藝不徹底。本發明通過對燀制飲片進行色譜分析，所得特征圖譜能夠反映飲片中酶的活性，進而判斷燀制工藝是否徹底。該方法能通過色譜檢測能反映燀制飲片中酶的活性，且能從數值上進行判斷燀制工藝的優劣，更直觀，更便于技術人員進行判斷。

技術領域

本發明涉及中藥質量檢測技術領域，尤其涉及一種通過特征圖譜判斷燀制工藝的方法。

背景技術

桃仁、杏仁和郁李仁等藥材在現今處方中多以燀制飲片為主。根據相關研究證實，經過燀制后得到相應的飲片，可達到以下目的：(1)降低毒性。由于生用有小毒，燀制后可降低毒性，使用藥安全。(2)除去非藥用部位，便于有效成分煎出，提高藥效。(3)殺酶保苷，這里的酶是指苦杏仁苷酶，苷是指苦杏仁苷。

苦杏仁苷酶是一類混合酶，主要包括植物源β-葡萄糖苷酶(BGLu)、羥基腈裂解酶(HNLs)及其他酶類，主要用于將苦杏仁苷逐步水解成苯甲醛、葡萄糖、氫氰酸及中間產物，常見于桃仁、苦杏仁和郁李仁等種子類藥材。現代研究證實，苦杏仁苷的主要作用為止咳平喘。藥理試驗表明，苦杏仁苷止咳作用機制是其被苦杏仁酶水解，產生的氫氰酸和苯甲醛對呼吸中樞有抑制作用，從而達到止咳平喘的功效。

目前存在的問題是對于燀制后的飲片質量缺乏有效控制。以燀桃仁為例，目前主流的手段是按中國藥典桃仁的含量測定項對苦杏仁苷進行檢測。我們研究發現，單純地按上述方法無法準確地評價燀制效果。如果燀制不徹底，達不到殺酶保苷的作用，則會影響有效成分苦杏仁苷的藥效作用發揮。

苦味酸試紙法常用于檢測水中氰化物的含量。由于苦杏仁苷會受到苦杏仁苷酶的作用，最終降解生產氫氰酸，因此在桃仁、杏仁和郁李仁等藥材炮制中，可間接用于反映苦杏仁苷酶活性，進而判斷燀制是否徹底。但該方法只能定性判斷，靈敏度不高，且苦味酸試紙需避光保存，容易失效。因此迫切需要開發一種直接判斷燀制工藝的有效方法。

發明內容

本發明的目的在于提出一種通過特征圖譜判斷燀制工藝的方法，可有效檢測燀制工藝所得飲片是否合格進而判斷燀制工藝是夠徹底。

為達此目的，本發明采用以下技術方案：

一種通過特征圖譜判斷燀制工藝的方法，包括以下步驟：

(1)制備以燀制工藝所得飲片的供試品溶液；

(2)對供試品溶液以高效液相色譜儀進行檢測，以甲醇為流動相A，以0.1％磷酸溶液為流動相B，得到特征圖譜；

(3)分析特征圖譜中苦杏仁苷峰面積，以苦杏仁苷峰面積與總峰面積的比值判斷所述飲片是否合格，若飲片合格則燀制工藝徹底，若飲片不合格則燀制工藝不徹底。

進一步的，所述步驟(3)中，當苦杏仁苷峰面積與總峰面積的比值大于0.6時，所述飲片合格。

進一步的，所述步驟(2)中，以高效液相色譜儀進行檢測時的洗脫梯度如下：

0min，甲醇5％，0.1磷酸溶液95％；

3min，甲醇15％，0.1磷酸溶液85％；

6min，甲醇25％，0.1磷酸溶液75％；

8min，甲醇35％，0.1磷酸溶液65％；

11min，甲醇35％，0.1磷酸溶液65％；

12min，甲醇100％，0.1磷酸溶液0％；