[發明專利]一種分枝桿菌的17β-羥基類固醇脫氫酶突變體及其異源表達有效
| 申請號： | 202011620795.8 | 申請日： | 2020-12-31 |
| 公開（公告）號： | CN112592904B | 公開（公告）日： | 2023-02-07 |
| 發明（設計）人： | 許正宏;李會;劉偉;史勁松;張曉梅;龔勁松 | 申請（專利權）人： | 江南大學 |
| 主分類號： | C12N9/04 | 分類號： | C12N9/04;C12N15/53;C12N15/75;C12N1/21;C12P33/06;C12R1/125 |
| 代理公司： | 南京經緯專利商標代理有限公司 32200 | 代理人： | 唐蕙芬 |
| 地址： | 214122 江蘇*** | 國省代碼： | 江蘇;32 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關鍵詞： | 一種 分枝桿菌 17 羥基 類固醇 脫氫酶 突變體 及其 表達 | ||
【權利要求書】：
1.一種17β-羥基類固醇脫氫酶突變體，其特征在于：氨基酸序列如SEQ IDNO:4所示。
2.一種17β-羥基類固醇脫氫酶突變體的基因，其特征在于：核苷酸序列為以下任意一種：
a)如SEQ ID NO:3所示的堿基序列；
b)編碼由如SEQ ID NO:4所示的氨基酸序列組成的蛋白質。
3.一種用于編碼17β-羥基類固醇脫氫酶突變體的重組表達質粒，其特征在于：含有權利要求2所述的核苷酸序列。
4.一株表達17β-羥基類固醇脫氫酶的工程菌株，其特征在于，所述工程菌株含有權利要求2所述的17β-羥基類固醇脫氫酶突變體的基因表達載體，或含有權利要求3所述的重組表達質粒。
5.根據權利要求4所述的工程菌株，其特征在于，所述工程菌株的宿主微生物為枯草芽孢桿菌WB600。
6.一種制備寶丹酮的方法，其特征在于，利用如權利要求4或5所述的工程菌株進行底物轉化制備寶丹酮，其中，所述底物為雄甾烯-1，4-烯-3，17-二酮，底物濃度為3g/L。
7.根據權利要求6所述的方法，其特征在于，將所述工程菌株轉接至含3g/L雄甾烯-1，4-烯-3，17-二酮的培養基中，30-37℃，220r·min-1轉化24-30h，得到寶丹酮。
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