[發明專利]一種測定丙氨酰谷氨酰胺含量的方法

在審

• 申請號: 202011618239.7
• 申請日: 2020-12-31
• 公開（公告）號: CN112683827A
• 公開（公告）日: 2021-04-20
• 發明（設計）人: 王滋善;張厚之
• 申請（專利權）人: 南京肽谷生物科技有限公司
• 主分類號: G01N21/31
• 分類號: G01N21/31
• 代理公司: 南京瑞華騰知識產權代理事務所(普通合伙) 32368
• 代理人: 錢麗

本發明公開了一種測定丙氨酰谷氨酰胺含量的方法，按照先后順序包括以下步驟：S1：配置丙氨酰谷氨酰胺標準樣品；S2：標準溶液的檢測；S3：待測樣品的配置；S4：待測樣品的檢測。該測定丙氨酰谷氨酰胺含量的方法檢測速度快、準確性高，且使用水溶液作為溶劑，更加安全，本發明采用多組檢測樣品，分梯度濃度檢測，檢測的準確性更高，使用起來更加方便。

技術領域

本發明屬于丙氨酰谷氨酰胺含量測定技術領域，具體涉及一種測定丙氨酰谷氨酰胺含量的方法。

背景技術

丙氨酰谷氨酰胺是腸外營養的一個組成部分，適用于需要補充谷氨酰胺的病人，包括處于分解代謝和高代謝狀況的病人。使用時通常是將它加入到其它的氨基酸溶液中，也可以加入到含有氨基酸的輸液中。

目前，丙氨酰谷氨酰胺已經能夠進行成熟的工業化生產，在丙氨酰谷氨酰胺的實際生產中需要對中間產品進行取樣檢驗，由于工廠的生產批次多，因此待測樣品的數量也很多。但是，目前所用的丙氨酰谷氨酰胺檢測方法是液相檢測法，其檢測速度較慢，檢測中需要使用有毒的有機溶劑，且檢測過程中如果發生斷電則會導致整個檢測過程作廢，也就是說檢測過程不可恢復。因此，現有技術中丙氨酰谷氨酰胺的檢測方法還存在諸多缺陷。

發明內容

本發明的目的在于提供一種測定丙氨酰谷氨酰胺含量的方法，以解決上述背景技術中提出的問題。

為實現上述目的，本發明提供如下技術方案：一種測定丙氨酰谷氨酰胺含量的方法，按照先后順序包括以下步驟：

S1：配置丙氨酰谷氨酰胺標準樣品：將40-80mg丙氨酰谷氨酰胺的標準樣品溶解于純水中，定容至100-200mL，配置成0.4g/L的標準樣品母液，然后再制備成1、10、20、30、40mg/L不同梯度的標準溶液；

S2：標準溶液的檢測：使用分光光度計將上述步驟中不同梯度的標準溶液進行檢測，根據所得吸光度制得標準曲線，然后按照標準曲線并根據朗伯比爾定律獲得線性回歸方程；

S3：待測樣品的配置：將待測樣品溶解于純水中配置成母液，然后將母液依次稀釋10倍、20倍、30倍和40倍，得到5個濃度梯度的待測樣品溶液，然后將每個梯度的待測樣品溶液分成3份，共得15個待測樣品溶液；

S4：待測樣品的檢測：使用分光光度計將上述步驟中得到的15個待測樣品溶液進行檢測，測定其吸光度，然后根據步驟S2得到的線性回歸方程計算出待測樣品中丙氨酰谷氨酰胺的含量。

優選的是，在步驟S1中，所述不同梯度的標準溶液的配置過程為分別取0.25、2.5、5.0、7.5、10mL的標準樣品母液置于100mL的容量瓶中定容，即得到1、10、20、30、40mg/L不同梯度的標準溶液。

上述任一方案中優選的是，在步驟S2中，所述分光光度計檢測所用的波長為200-500納米之間測定含丙氨酰谷氨酰胺的標準溶液的吸光度，每隔10納米測一次吸光度，確定最大吸光度值以及對應的波長。

上述任一方案中優選的是，在所述最大吸光度對應的波長前后每隔1納米依次測定吸光度，確定最大吸光度對應的波長。

上述任一方案中優選的是，所述步驟S4中的分光光度計測定波長與步驟S2中的相同。

上述任一方案中優選的是，在步驟S4中，所述3份待測樣品溶液測得的丙氨酰谷氨酰胺的含量取平均值，初步丙氨酰谷氨酰胺的含量。

上述任一方案中優選的是，在步驟S4中，所述每個梯度的待測樣品測得的丙氨酰谷氨酰胺的含量取平均值，最終得到丙氨酰谷氨酰胺的含量。

上述任一方案中優選的是，在步驟S3中，所述母液依次稀釋50倍、60倍、70倍，再得到三個濃度梯度的待測樣品溶液，將每個梯度的待測樣品溶液分成3份，共得9個待測樣品溶液。