[發明專利]一種測定丙氨酰谷氨酰胺含量的方法

在審

• 申請號: 202011618239.7
• 申請日: 2020-12-31
• 公開（公告）號: CN112683827A
• 公開（公告）日: 2021-04-20
• 發明（設計）人: 王滋善;張厚之
• 申請（專利權）人: 南京肽谷生物科技有限公司
• 主分類號: G01N21/31
• 分類號: G01N21/31
• 代理公司: 南京瑞華騰知識產權代理事務所(普通合伙) 32368
• 代理人: 錢麗

1.一種測定丙氨酰谷氨酰胺含量的方法，其特征在于：按照先后順序包括以下步驟：

S1：配置丙氨酰谷氨酰胺標準樣品：將40-80mg丙氨酰谷氨酰胺的標準樣品溶解于純水中，定容至100-200mL，配置成0.4g/L的標準樣品母液，然后再制備成1、10、20、30、40mg/L不同梯度的標準溶液；

S2：標準溶液的檢測：使用分光光度計將上述步驟中不同梯度的標準溶液進行檢測，根據所得吸光度制得標準曲線，然后按照標準曲線并根據朗伯比爾定律獲得線性回歸方程；

S3：待測樣品的配置：將待測樣品溶解于純水中配置成母液，然后將母液依次稀釋10倍、20倍、30倍和40倍，得到5個濃度梯度的待測樣品溶液，然后將每個梯度的待測樣品溶液分成3份，共得15個待測樣品溶液；

S4：待測樣品的檢測：使用分光光度計將上述步驟中得到的15個待測樣品溶液進行檢測，測定其吸光度，然后根據步驟S2得到的線性回歸方程計算出待測樣品中丙氨酰谷氨酰胺的含量。

2.根據權利要求1所述的一種測定丙氨酰谷氨酰胺含量的方法，其特征在于：在步驟S1中，所述不同梯度的標準溶液的配置過程為分別取0.25、2.5、5.0、7.5、10mL的標準樣品母液置于100mL的容量瓶中定容，即得到1、10、20、30、40mg/L不同梯度的標準溶液。

3.根據權利要求1所述的一種測定丙氨酰谷氨酰胺含量的方法，其特征在于：在步驟S2中，所述分光光度計檢測所用的波長為200-500納米之間測定含丙氨酰谷氨酰胺的標準溶液的吸光度，每隔10納米測一次吸光度，確定最大吸光度值以及對應的波長。

4.根據權利要求3所述的一種測定丙氨酰谷氨酰胺含量的方法，其特征在于：在所述最大吸光度對應的波長前后每隔1納米依次測定吸光度，確定最大吸光度對應的波長。

5.根據權利要求1所述的一種測定丙氨酰谷氨酰胺含量的方法，其特征在于：所述步驟S4中的分光光度計測定波長與步驟S2中的相同。

6.根據權利要求1所述的一種測定丙氨酰谷氨酰胺含量的方法，其特征在于：在步驟S4中，所述3份待測樣品溶液測得的丙氨酰谷氨酰胺的含量取平均值，初步丙氨酰谷氨酰胺的含量。

7.根據權利要求6所述的一種測定丙氨酰谷氨酰胺含量的方法，其特征在于：在步驟S4中，所述每個梯度的待測樣品測得的丙氨酰谷氨酰胺的含量取平均值，最終得到丙氨酰谷氨酰胺的含量。

8.根據權利要求1所述的一種測定丙氨酰谷氨酰胺含量的方法，其特征在于：在步驟S3中，所述母液依次稀釋50、60、70倍，再得到三個濃度梯度的待測樣品溶液，將每個梯度的待測樣品溶液分成3份，共得9個待測樣品溶液。