[發明專利]一種捕獲單克隆抗體-腫瘤壞死因子融合蛋白的親和純化方法

有效

• 申請號: 202011611594.1
• 申請日: 2020-12-30
• 公開（公告）號: CN112574321B
• 公開（公告）日: 2023-10-20
• 發明（設計）人: 方國波;蔡則玲;吳珩
• 申請（專利權）人: 上海賽金生物醫藥有限公司
• 主分類號: C07K19/00
• 分類號: C07K19/00;C07K1/22;A61L2/18
• 代理公司: 上海一平知識產權代理有限公司 31266
• 代理人: 王正君;徐迅

1.一種對抗體-腫瘤壞死因子融合蛋白進行純化的方法，其特征在于，包括步驟：

(a)提供一待純化的原料，其中所述原料含有抗體-腫瘤壞死因子融合蛋白；

(b)將所述待純化的原料進行親和層析，收集含有樣品峰的洗脫液，所述親和層析的填料選自下組：Mabselecct SuRe、Prism A、Mabcapture A、Amsphere A3、Eshmuno A、KancapA3G、Unimab 50、或其組合，所述洗脫液為含有抗體-腫瘤壞死因子融合蛋白的中間產品。

2.如權利要求1所述的方法，其特征在于，所述抗體-腫瘤壞死因子融合蛋白包括抗Her-2人源化單克隆抗體-腫瘤壞死因子a融合蛋白。

3.如權利要求1所述的方法，其特征在于，所述填料選自下組：KancapA 3G、Unimab 50、或其組合。

4.如權利要求1所述的方法，其特征在于，所述步驟(b)中還包括：

(b1)用淋洗緩沖液對層析柱進行淋洗；和/或

(b2)用平衡緩沖液對層析柱進行平衡；和

(b3)用洗脫緩沖液洗脫，并收集含有樣品峰的洗脫液，所述洗脫液為含有抗體-腫瘤壞死因子融合蛋白的中間產品。

5.如權利要求4所述的方法，其特征在于，步驟(b1)中，所述淋洗緩沖液選自下組：醋酸-醋酸鈉緩沖液、Tris-鹽酸緩沖液、枸櫞酸緩沖液、磷酸鹽緩沖液、甘氨酸-鹽酸緩沖液、或其組合。

6.如權利要求4所述的方法，其特征在于，步驟(b2)中，所述平衡緩沖液選自下組：磷酸鹽緩沖液、Tris-鹽酸緩沖液、或其組合。

7.如權利要求4所述的方法，其特征在于，步驟(b3)中，所述洗脫緩沖液選自下組：醋酸-醋酸鈉緩沖液、甘氨酸-鹽酸緩沖液、枸櫞酸緩沖液、精氨酸-鹽酸緩沖液、或其組合。

8.如權利要求4所述的方法，其特征在于，所述洗脫緩沖液的濃度為10－300mmol/L，較佳地，10－200mmol/L，更佳地，20－100mmol/L。

9.如權利要求4所述的方法，其特征在于，所述步驟(b3)中，所述洗脫液的pH為3.2－5，較佳地，3.8-4。

10.如權利要求1所述的方法，其特征在于，所述洗脫液中，所述聚集體含量≤10％，較佳地，≤5％，更佳地，≤2％。