[發(fā)明專(zhuān)利]通過(guò)基因編輯得到的與不結(jié)球白菜自交親和性狀相關(guān)的等位基因及其應(yīng)用

有效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 202011607747.5
• 申請(qǐng)日: 2020-12-30
• 公開(kāi)（公告）號(hào): CN112575004B
• 公開(kāi)（公告）日: 2021-11-19
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 高長(zhǎng)斌;汪愛(ài)華;張雪麗;宋莉萍;林處發(fā)
• 申請(qǐng)（專(zhuān)利權(quán)）人: 武漢市農(nóng)業(yè)科學(xué)院
• 主分類(lèi)號(hào): C12N15/29
• 分類(lèi)號(hào): C12N15/29;C12N15/11;C12N15/82;C12Q1/6895;C12Q1/6809;A01H1/02;A01H1/04;A01H5/00;A01H6/20
• 代理公司: 重慶項(xiàng)乾光宇專(zhuān)利代理事務(wù)所(普通合伙) 50244
• 代理人: 高姜

1.通過(guò)基因編輯得到的與不結(jié)球白菜自交親和性狀相關(guān)的等位基因，其核苷酸序列如SEQ ID No.1所示。

2.核苷酸序列如SEQ ID No.1所示的等位基因的分子標(biāo)記，其特征在于，該分子標(biāo)記通過(guò)PCR擴(kuò)增獲得，擴(kuò)增引物的核苷酸序列如SEQ ID No.19和SEQ ID No.20所示。

3.權(quán)利要求1所述的通過(guò)基因編輯得到的與不結(jié)球白菜自交親和性狀相關(guān)的等位基因在不結(jié)球白菜育種中的應(yīng)用。

4.權(quán)利要求2所述的核苷酸序列如SEQ ID No.1所示的等位基因的分子標(biāo)記在不結(jié)球白菜育種中的應(yīng)用。

5.與不結(jié)球白菜自交親和性狀相關(guān)的等位基因的獲得方法，其特征在于，包括如下步驟：根據(jù)BnSRK1基因的結(jié)構(gòu)信息，在其外顯子1區(qū)域設(shè)計(jì)靶位點(diǎn)，對(duì)靶位點(diǎn)片段進(jìn)行PCR擴(kuò)增，將擴(kuò)增片段與基因編輯表達(dá)載體進(jìn)行重組，轉(zhuǎn)化大腸桿菌，獲得陽(yáng)性克隆；通過(guò)農(nóng)桿菌介導(dǎo)的方法轉(zhuǎn)化甘藍(lán)型油菜品系‘Westar’下胚軸，獲得轉(zhuǎn)基因再生植株，擴(kuò)增靶位點(diǎn)，擴(kuò)增產(chǎn)物進(jìn)行測(cè)序分析，靶位點(diǎn)序列發(fā)生突變的植株中的BnSRK1即為基因編輯得到的等位基因；靶位點(diǎn)的核苷酸序列如SEQ ID No.5所示。