[發明專利]一種DNA雜交增強液及其制備方法與應用在審
| 申請號: | 202011607529.1 | 申請日: | 2020-12-30 |
| 公開(公告)號: | CN112626180A | 公開(公告)日: | 2021-04-09 |
| 發明(設計)人: | 楊德剛;高云周;趙偉;張榮;劉明坤;葉鋒 | 申請(專利權)人: | 北京思爾成生物技術有限公司 |
| 主分類號: | C12Q1/6832 | 分類號: | C12Q1/6832;C12Q1/6841 |
| 代理公司: | 北京紀凱知識產權代理有限公司 11245 | 代理人: | 關暢 |
| 地址: | 100176 北京市大興區經濟技*** | 國省代碼: | 北京;11 |
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| 摘要: | |||
| 搜索關鍵詞: | 一種 dna 雜交 增強 及其 制備 方法 應用 | ||
1.一種DNA雜交增強液,其特征在于:該DNA雜交增強液包括如下濃度組分組成:
緩沖劑的溶液作為溶質;
雜交促進劑:聚合物2~60g/100ml,有機溶劑體積百分比10~80%,蛋白質質量體積百分比0.5~10g/100ml;
鹽類:10mM~500mM。
2.根據權利要求1所述的DNA雜交增強液,其特征在于:所述緩沖劑選自SSC、HEPES、TRIS、磷酸鉀、檸檬酸中的至少一種;
所述DNA雜交增強液中所述緩沖劑的質量體積終濃度為0.4%~8.8%;
所述DNA雜交增強液的最終pH值為6~8
3.根據權利要求1或2所述的DNA雜交增強液,其特征在于:所述聚合物選自Ficoll、PVP、肝素和葡聚糖硫酸鹽中的至少一種;
所述蛋白質包括牛血清白蛋白;
所述有機溶劑選自乙二醇、甘油、1,3-丙二醇、丙二醇、甲酰胺、二甘醇甲酰胺、二甲基甲酰胺和DMSO中的至少一種。
4.根據權利要求1-3中任一項所述的DNA雜交增強液,其特征在于:所述鹽類包括氯化鈉、氯化鎂、磷酸鈉和磷酸鎂中的至少一種;
所述鹽類的濃度為10mM~500mM。
5.根據權利要求1-4中任一項所述的DNA雜交增強液,其特征在于:DNA雜交增強液由如下濃度組分組成:
2×SSC緩沖液或Tris緩沖液作為溶劑;
葡聚糖硫酸鹽質量體積百分比為40g/100ml、甲酰胺體積百分比為10%及BSA質量體積百分比為1g/100ml;
氯化鈉300mM和氯化鎂10mM。
6.一種權利要求1-5中任一項所述的DNA雜交增強液的制備方法,包括如下步驟:所述緩沖液中加入所述雜交促進劑混合,再加入所述鹽類混合,最后調節pH值,即得到所述的DNA雜交增強液。
7.權利要求1-6中任一項所述的DNA雜交增強液在DNA FISH產品中的應用。
8.根據權利要求7所述應用,其特征在于:所述的雜交增強液與含雜交液的商業探針的體積比為2~8:1。
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