[發明專利]一種海綿來源鏈霉菌及其抑制己糖激酶II活性物質的制備和應用有效

申請號：	202011604925.9	申請日：	2020-12-30
公開（公告）號：	CN112725227B	公開（公告）日：	2022-07-05
發明（設計）人：	潘華奇;白巖;胡江春;姚雪春	申請（專利權）人：	中國科學院沈陽應用生態研究所
主分類號：	C12N1/20	分類號：	C12N1/20;C12P17/06;C12P7/42;C12P17/10;C12P19/28;C07D309/38;A61K31/366;A61P35/00;C12R1/465
代理公司：	沈陽科苑專利商標代理有限公司 21002	代理人：	何薇;李穎
地址：	110016 遼***	國省代碼：	遼寧;21
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摘要：
搜索關鍵詞：	一種海綿來源霉菌及其抑制激酶 ii 活性物質制備應用
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【權利要求書】：

1.一種海綿來源鏈霉菌，其特征在于：海洋鏈霉菌為Streptomyces sp. 18A01，于2020年12月10日保藏于中國普通微生物菌種保藏管理中心，保藏編號：CGMCC 21351。

2.按權利要求1所述的海綿來源鏈霉菌，其特征在于：所述海洋鏈霉菌含8.76Mbp基因組；所述基因組中含有合成產生Desferrioxamine B、Geosmin、Isorenieratene、Hopene、Albaflavenone、Germicidin、SapB (lanthipeptide)、Spore pigment、Calcium-dependentantibiotic (CDA)、Coelimycin P1、Undecylprodigiosin、Coelichelin、Melanin、Coelibactin和Actinorhodin骨架化合物的基因簇。

3.一種權利要求1所述的海綿來源鏈霉菌的應用，其特征在于：所述海洋鏈霉菌18A01代謝產物作為己糖激酶II抑制劑或抗腫瘤候選藥物中的應用。

4.一種權利要求1所述的海綿來源鏈霉菌的應用，其特征在于：所述海洋鏈霉菌18A01代謝產物在制備α-吡喃酮類germicidins、阿魏酸、α-ribazole和N-acetyltryptophan中任意一類化合物中的應用。

5.按權利要求3或4所述的海綿來源鏈霉菌的應用，其特征在于：所述海洋鏈霉菌18A01代謝產物的制備：

1）將權利要求1所述海洋鏈霉菌18A01接種于ISP3固體培養基上培養2-5d活化，然后接種于含人工海鹽的ISP3液體培養基，28 ℃培養2-4d作為種子液；再將發酵種子液按照體積百分比2-10%接種于含人工海鹽的ISP3液體培養基，28 ℃振蕩培養5-10d；

2) 將發酵液離心去菌體獲得發酵上清液，用大孔吸附樹脂XAD16固相吸附發酵液中活性成分，樹脂與發酵液體積百分比為3%-6%；吸附2h-4h后，先用蒸餾水洗滌樹脂，再用甲醇解吸，回收甲醇溶劑后得的粗提物A，即為海洋鏈霉菌18A01代謝產物。

6.按權利要求5所述的海綿來源鏈霉菌的應用，其特征在于：所述粗提物A進一步純化制備獲得germicidins、阿魏酸、α-ribazole和N-acetyltryptophan：將粗提物A，采用快速硅膠柱色譜法分離，按照二氯甲烷：甲醇(v/v)比為100:0-0:100梯度洗脫，獲得4個流分（F_A-F_D）；將流份F_B采用半制備反相HPLC，經35%的甲醇水溶液洗脫，流速為2.5 mL/min，獲得化合物germicidin P (1)、germicidin Q (2)、germicidin R (3)、germicidin S (4)、germicidin L (11)、germicidin M (12)、(1S, 2S)-germicidin N (13)；將流份F_A經凝膠LH20除雜，采用半制備反相HPLC，經40%-55%的甲醇水溶液洗脫，流速為2.5 mL/min，獲得化合物germicidin A (5)、germicidin B (6)、isogermicidin B (7)、germicidin C (8)、germicidin D (9)、germicidin H (10)、阿魏酸（14）；將流份F_C經凝膠LH20除雜，采用半制備反相HPLC，經25%的甲醇水溶液洗脫，流速為2.5 mL/min，獲得化合物α-ribazole（15）；將流份F_D經凝膠LH20除雜，采用半制備反相HPLC，經30%的甲醇水溶液洗脫，流速為2.5 mL/min，獲得化合物N-acetyltryptophan (16)。