[發明專利]一種提取高山被孢霉所含油脂的方法

在審

• 申請號: 202011602570.X
• 申請日: 2020-12-30
• 公開（公告）號: CN112608851A
• 公開（公告）日: 2021-04-06
• 發明（設計）人: 鄭震堃;李媛媛;陳璇;鄭曉輝;許團輝;吳奕武;陳蝶玲;王文謙
• 申請（專利權）人: 潤科生物工程（福建）有限公司
• 主分類號: C12N1/14
• 分類號: C12N1/14;C12N1/02;C12N1/06;C12P7/64;C11B1/00;C12R1/645
• 代理公司: 汕頭市潮睿專利事務有限公司 44230
• 代理人: 林天普;朱明華

1.一種提取高山被孢霉所含油脂的方法，其特征在于包括以下步驟：

（1）將產油微生物高山被孢霉菌種接種到液體培養基中發酵，得到微生物發酵液；

（2）將步驟（1）得到的微生物發酵液進行過濾，得到高山被孢霉濕細胞；再將高山被孢霉濕細胞溶于重量百分比濃度為3~5%的氯化鈉溶液中，得到高山被孢霉細胞溶液，高山被孢霉細胞溶液中高山被孢霉細胞的重量百分比濃度按干物質計為10~20%；然后對高山被孢霉細胞溶液進行乳化剪切，調節高山被孢霉細胞溶液的溫度至40~60℃；

（3）將步驟（2）得到的高山被孢霉細胞溶液的pH值調節至6.5~7.5，再向高山被孢霉細胞溶液中加入自溶誘導劑，自溶誘導劑的添加量為高山被孢霉細胞干物質重量的1.5~2.5%；然后持續進行攪拌，在真空無氧環境中使高山被孢霉細胞自溶8~12小時，得到高山被孢霉自溶液；

（4）采用離心機對高山被孢霉自溶液進行離心分離，收集上層油脂；

（5）收集步驟（4）離心分離得到的下層固體，再將該下層固體與80~90℃的純化水混合均勻，經過離心機離心分離并收集上層油脂；

（6）將步驟（4）收集的上層油脂與步驟（5）收集的上層油脂混合，得到所需的油脂。

2.根據權利要求1所述的提取高山被孢霉所含油脂的方法，其特征是：步驟（2）中，將步驟（1）得到的微生物發酵液進行板框過濾，得到高山被孢霉濕細胞。

3.根據權利要求1所述的提取高山被孢霉所含油脂的方法，其特征是：步驟（2）中，采用高剪切乳化機，在轉子轉速為8000-12000轉/分鐘的情況下對高山被孢霉細胞溶液乳化剪切5-15分鐘。

4.根據權利要求1所述的提取高山被孢霉所含油脂的方法，其特征是：步驟（3）中所用的自溶誘導劑是幾丁質酶、纖維素酶、β葡聚糖酶、木瓜蛋白酶和中性蛋白酶中的一種或其中多種的組合。

5.根據權利要求4所述的提取高山被孢霉所含油脂的方法，其特征是：步驟（3）中所用的自溶誘導劑由幾丁質酶、纖維素酶、β葡聚糖酶、木瓜蛋白酶和中性蛋白酶組成，其重量比例為幾丁質酶∶纖維素酶∶β葡聚糖酶∶木瓜蛋白酶∶中性蛋白酶=（1-3）∶（1-3）∶（1-3）∶（1-3）∶（1-3）。

6.根據權利要求4所述的提取高山被孢霉所含油脂的方法，其特征是：步驟（3）中所用的自溶誘導劑由幾丁質酶、纖維素酶、木瓜蛋白酶和中性蛋白酶組成，其重量比例為幾丁質酶∶纖維素酶∶木瓜蛋白酶∶中性蛋白酶=（1-3）∶（1-3）∶（1-3）∶（1-3）。

7.根據權利要求4所述的提取高山被孢霉所含油脂的方法，其特征是：步驟（3）中所用的自溶誘導劑由幾丁質酶、纖維素酶和中性蛋白酶組成，其重量比例為幾丁質酶∶纖維素酶∶中性蛋白酶=1∶（1-3）∶（1-3）。

8.根據權利要求1所述的提取高山被孢霉所含油脂的方法，其特征是：步驟（3）自溶過程中全程監控pH值，使用磷酸與氨水調節pH值在6.5~7.5的范圍內。

9.根據權利要求1所述的提取高山被孢霉所含油脂的方法，其特征是：步驟（4）中，采用離心機，在轉子轉速為10000-15000轉/分鐘的情況下對高山被孢霉細胞溶液離心5-15分鐘。

10.根據權利要求1所述的提取高山被孢霉所含油脂的方法，其特征是：步驟（5）中，采用離心機，在轉子轉速為10000-15000轉/分鐘的情況下對下層固體與純化水的混合液離心5-15分鐘。