[發明專利]一種提取高山被孢霉所含油脂的方法

在審

• 申請號: 202011602570.X
• 申請日: 2020-12-30
• 公開（公告）號: CN112608851A
• 公開（公告）日: 2021-04-06
• 發明（設計）人: 鄭震堃;李媛媛;陳璇;鄭曉輝;許團輝;吳奕武;陳蝶玲;王文謙
• 申請（專利權）人: 潤科生物工程（福建）有限公司
• 主分類號: C12N1/14
• 分類號: C12N1/14;C12N1/02;C12N1/06;C12P7/64;C11B1/00;C12R1/645
• 代理公司: 汕頭市潮睿專利事務有限公司 44230
• 代理人: 林天普;朱明華

一種提取高山被孢霉所含油脂的方法，包括以下步驟：（1）將高山被孢霉菌種接種到液體培養基中發酵，得到發酵液；（2）過濾得到高山被孢霉濕細胞并溶于氯化鈉溶液中，得到高山被孢霉細胞溶液，然后進行乳化剪切，調節溫度至40~60℃；（3）調節高山被孢霉細胞溶液的pH值至6.5~7.5，加入自溶誘導劑，再持續進行攪拌，在真空無氧環境中使高山被孢霉細胞自溶8~12小時，得到高山被孢霉自溶液；（4）進行離心分離，收集上層油脂；（5）收集步驟（4）離心分離得到的下層固體并與純化水混合均勻，離心分離并收集上層油脂；（6）將步驟（4）和（5）收集的上層油脂混合。本發明能有效提取出高山被孢霉細胞內的油脂，工藝簡單，低能耗，有利于實現規模化生產。

技術領域

本發明涉及油脂提取方法，具體涉及一種提取高山被孢霉所含油脂的方法。

背景技術

多不飽和脂肪酸（PUFAs）對人體的生長發育及身體健康起著至關重要的作用。人體維持各種組織的正常功能，必須保證有充足的各種脂肪酸，如果缺乏，則會引發一系列癥狀，包括生長發育遲緩、皮膚異常鱗屑、智力障礙等。例如花生四烯酸（ARA）作為一種重要的PUFAs，在嬰幼兒增強記憶、思維能力保護視力，提高智力等方面具有非常顯著的作用。當嬰兒膳食中長期缺乏ARA時，會導致嬰幼兒患遲發型的敗血癥。

在ARA油脂制造行業，有機溶劑經常作為萃取劑被使用，后續一般是通過真空干燥把有機溶劑從產品中蒸發出來。如果真空干燥溫度、真空度和時間控制不恰當，那么有機溶劑在產品中的殘留量在一定程度上會增加，從而進入后續的生產過程中，最終被消費者食用。有機溶劑最大的特點就是易揮發，繼而通過呼吸道進入人的體內，從而損害中樞神經和呼吸道，甚至內臟器官。因此，若有可能，應減少使用有機溶劑，以減少看不見的危害進入食品鏈的可能。

花生四烯酸（ARA）主要來源于魚油、動物肝臟提取油脂和微生物發酵提取，其中利用高山被孢霉發酵提取ARA被廣泛采用。高山被孢霉來源的ARA油脂EPA含量低，異養發酵可以制備不含或者含很少量重金屬和有機污染物的ARA油脂。

高山被孢霉提取ARA油脂的特殊之處在于，細胞破壁后油脂無法直接游離于發酵液中，油脂會與細胞壁的糖類、蛋白質結合，這是業界一直困擾的問題、也是阻撓高山被孢霉非溶劑法提取ARA油脂的關鍵因素。高山被孢霉提取ARA油脂若使用堿酶法破壁提油，油脂游離到發酵液中容易與堿發生皂化反應，降低了提油得率。

目前使用微生物發酵生產ARA油脂的技術已經非常成熟，但是在微生物發酵生產ARA油脂的提取工藝上仍存在上述一些問題，需要進行改進。CN101195813A的專利申請公開了一種使用高壓均質破碎細胞壁提取油脂的工藝， 該工藝需要使用到120MPa的高壓多次對微生物細胞進行破碎，生產所需要的能耗巨大，不利于實現大規模生產。CN 101985637B的專利申請公開了一種使用微生物自溶提取微生物油脂的方法，該工藝需要使用到6號抽提溶劑、己烷、庚烷或石油醚，這為企業生產帶來了不穩定的風險，也為有機溶劑殘留危害進入食品鏈提供了可能。

發明內容

本發明所要解決的技術問題是提供一種提取高山被孢霉所含油脂的方法，該提取方法能有效提取出高山被孢霉細胞內的油脂（如ARA油脂），工藝簡單，低能耗，有利于實現規模化生產。采用的技術方案如下：

一種提取高山被孢霉所含油脂的方法，其特征在于包括以下步驟：

（1）將產油微生物高山被孢霉菌種接種到液體培養基中發酵，得到微生物發酵液；

（2）將步驟（1）得到的微生物發酵液進行過濾，得到高山被孢霉濕細胞；再將高山被孢霉濕細胞溶于重量百分比濃度為3~5%的氯化鈉溶液中，得到高山被孢霉細胞溶液，高山被孢霉細胞溶液中高山被孢霉細胞的重量百分比濃度按干物質計為10~20%；然后對高山被孢霉細胞溶液進行乳化剪切，調節高山被孢霉細胞溶液的溫度至40~60℃；