[發明專利]一種同時靶向CD19和BCMA的雙靶點嵌合抗原受體及其應用

在審

• 申請號: 202011602001.5
• 申請日: 2020-12-29
• 公開（公告）號: CN112592927A
• 公開（公告）日: 2021-04-02
• 發明（設計）人: 姜鈺超;王苗苗;繆佳;劉根桃;吳國祥
• 申請（專利權）人: 上海科棋藥業科技有限公司
• 主分類號: C12N15/62
• 分類號: C12N15/62;C12N15/13;C12N15/867;C12N5/10;C07K19/00;A61K39/00;A61P35/00;A61P35/02
• 代理公司: 上海申新律師事務所 31272
• 代理人: 郎祺

1.一種多核苷酸，其特征在于，所述多核苷酸的序列為含依次連接的靶向CD19的嵌合抗原受體的編碼序列、連接肽的編碼序列和靶向BCMA的嵌合抗原受體的編碼序列的多核苷酸序列或其互補序列。

2.根據權利要求1所述的多核苷酸，其特征在于，所述靶向CD19的嵌合抗原受體的編碼序列包括抗CD19單鏈抗體的編碼序列；所述抗CD19單鏈抗體的編碼序列為SEQ ID NO.2。

3.根據權利要求1所述的多核苷酸，其特征在于，所述靶向BCMA的嵌合抗原受體的編碼序列包括抗BCMA單域抗體的編碼序列；所述抗BCMA單域抗體的編碼序列選自SEQ ID NO.9～12。

4.根據權利要求1所述的多核苷酸，其特征在于，所述連接肽為T2A自切割肽；所述T2A自切割肽的編碼序列為SEQ ID NO.7。

5.根據權利要求1所述的多核苷酸，其特征在于，所述靶向CD19的嵌合抗原受體的編碼序列包含依次連接的CD8信號肽的編碼序列、抗CD19單鏈抗體的編碼序列、CD8鉸鏈區的編碼序列、CD8跨膜區的編碼序列、41BB胞內區的編碼序列和CD3ζ胞內區的編碼序列。

6.根據權利要求5所述的多核苷酸，其特征在于，所述CD8信號肽的編碼序列為SEQ IDNO.1；所述抗CD19單鏈抗體的編碼序列為SEQ ID NO.2；所述CD8鉸鏈區的編碼序列為SEQID NO.3；所述CD8跨膜區的編碼序列為SEQ ID NO.4；所述41BB胞內區的編碼序列為SEQ IDNO.5；所述CD3ζ胞內區的編碼序列為SEQ ID NO.6。

7.根據權利要求1所述的多核苷酸，其特征在于，所述靶向BCMA的嵌合抗原受體的編碼序列含依次連接的GMCSFR信號肽的編碼序列、抗BCMA單域抗體的編碼序列、CD28鉸鏈區的編碼序列、CD28跨膜區的編碼序列、CD28胞內區的編碼序列和CD3ζ胞內區的編碼序列。

8.根據權利要求7所述的多核苷酸，其特征在于，所述GMCSFR信號肽的編碼序列為SEQID NO.8；所述抗BCMA單域抗體的編碼序列選自SEQ ID NO.9～12；所述CD28鉸鏈區的編碼序列為SEQ ID NO.13；所述CD28跨膜區的編碼序列為SEQ ID NO.14；所述CD28胞內區的編碼序列為SEQ ID NO.15；所述CD3ζ胞內區的編碼序列為SEQ ID NO.6。

9.如權利要求1-8任一項所述的多核苷酸編碼的同時靶向CD19和BCMA的雙靶點嵌合抗原受體，其特征在于，所述雙靶點嵌合抗原受體選自：

(1)含有依次連接的CD8信號肽、抗CD19單鏈抗體、CD8鉸鏈區、CD8跨膜區、41BB胞內區、CD3ζ胞內區、T2A自切割肽、GMCSFR信號肽、抗BCMA單域抗體、CD28鉸鏈區、CD28跨膜區、CD28胞內區、CD3ζ胞內區的融合蛋白；和

(2)在(1)限定的融合蛋白的氨基酸序列經過取代、缺失或添加一個或多個氨基酸且保留活化T細胞活性的由(1)衍生的融合蛋白。

10.根據權利要求9所述的雙靶點嵌合抗原受體，其特征在于，所述CD8信號肽的氨基酸序列為SEQ ID NO.16；所述抗CD19單鏈抗體的輕鏈可變區的氨基酸序列為SEQ ID NO.17；所述CD8鉸鏈區的氨基酸序列為SEQ ID NO.18；所述CD8跨膜區的氨基酸序列為SEQ IDNO.19；所述41BB胞內區的氨基酸序列為SEQ ID NO.20；所述CD3ζ胞內區的氨基酸序列為SEQ ID NO.21；所述T2A自切割肽的氨基酸序列為SEQ ID NO.22；所述GMCSFR信號肽的氨基酸序列為SEQ ID NO.23；所述抗BCMA單域抗體的氨基酸序列選自SEQ ID NO.24～27；所述CD28鉸鏈區的氨基酸序列為SEQ ID NO.28；所述CD28跨膜區的氨基酸序列為SEQ IDNO.29；所述CD28胞內區的氨基酸序列為SEQ ID NO.30。