[發明專利]一種保陰煎提取物多成分質量檢測方法

有效

• 申請號: 202011599015.6
• 申請日: 2020-12-29
• 公開（公告）號: CN114689780B
• 公開（公告）日: 2023-10-03
• 發明（設計）人: 周巧敏;胡昌江;付林;李莎;宋媛;吳琦;李湘菊;高銳;羅俊;周維
• 申請（專利權）人: 四川新綠色藥業科技發展有限公司
• 主分類號: G01N30/88
• 分類號: G01N30/88
• 代理公司: 成都天嘉知識產權代理有限公司 51211
• 代理人: 趙麗

1.一種保陰煎提取物多成分質量檢測方法，其特征在于，包括以下步驟：

A、對照品溶液制備：取馬錢苷酸、綠原酸、芍藥苷、黃芩苷、鹽酸小檗堿對照品適量，加入溶劑甲醇，制得含馬錢苷酸、綠原酸、芍藥苷、黃芩苷、鹽酸小檗對照品的混合對照品溶液，得對照品溶液；

B、供試品溶液制備：取保陰煎對照提取物，加入溶劑甲醇，制得供試品溶液；

C、高效液相色譜測定：分別吸取上述對照品溶液及供試品溶液，注入高效液相色譜儀，進行數據測定；

D、相對校正因子值確定：根據對照品溶液測得的馬錢苷酸、綠原酸、芍藥苷、黃芩苷、鹽酸小檗堿的峰面積，代入相對校正因子計算公式：相對校正因子（f）=A_s*C_r/C_s*A_r，以綠原酸為內標，分別計算得到馬錢苷酸、芍藥苷、黃芩苷、鹽酸小檗堿相對于綠原酸的相對校正因子；

E、根據對照品溶液的綠原酸峰面積得出其成分含量與峰面積關系的線性回歸方程，并將供試品溶液測得的綠原酸峰面積代入線性回歸方程即得樣品中綠原酸成分的含量，再以綠原酸的峰面積為對照，分別乘以校正因子，計算馬錢苷酸、芍藥苷、黃芩苷、鹽酸小檗堿的含量。

2.根據權利要求1所述的一種保陰煎提取物多成分質量檢測方法，其特征在于，步驟A中，對照品溶液具體制備方法為：取馬錢苷酸、綠原酸、芍藥苷、黃芩苷、鹽酸小檗堿對照品適量，精密稱定，加甲醇制成每1ml含馬錢苷酸、綠原酸、芍藥苷、黃芩苷、鹽酸小檗堿各40μg的混合溶液，作為混合對照品溶液，即得對照品溶液。

3.根據權利要求1所述的一種保陰煎提取物多成分質量檢測方法，其特征在于，步驟B中，供試品溶液具體制備方法為：取保陰煎提取物0.5g，精密稱定，置具塞錐形瓶中，精密加入70%甲醇25mL，密塞，稱定重量，超聲處理30分鐘，再稱定重量，用70%甲醇補足減失的質量，搖勻，濾過，取續濾液，即得供試品溶液。

4.根據權利要求1所述的一種保陰煎提取物多成分質量檢測方法，其特征在于：所述步驟C中，高效液相色譜儀測定條件是：

色譜柱：以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑，柱長為250mm，內徑為4.6mm，粒度為5μm；

柱溫為30℃；

流速：1.0mL/min；

進樣量：10μL；

檢測波長：235nm；

流動相A為乙腈，流動相B為0.1%磷酸水溶液，梯度脫洗。

5.根據權利要求4所述的根據權利要求1所述的一種保陰煎提取物多成分質量檢測方法，其特征在于，所述梯度洗脫過程為：

0～19min，流動相A為10～20%，流動相B為90～80%；

19～23min，流動相A為20～30%，流動相B為80～70%；

23～32min，流動相A為30%，流動相B為70%；

32～35min，流動相A為30～70%，流動相B為70～30%；

35～40min，流動相A為70%，流動相B為30%。

6.根據權利要求1-5任一項所述的一種保陰煎提取物多成分質量檢測方法，其特征在于：在步驟E中，測得的馬錢苷酸、綠原酸、芍藥苷、黃芩苷、鹽酸小檗堿的總量應為1.85%-3.43%。

7.根據權利要求6所述的一種保陰煎提取物多成分質量檢測方法，其特征在于，所述步驟B中，保陰煎對照提取物的制備方法為，包括以下步驟：

a1：按原料重量份數計，取飲片：取生地、熟地、芍藥各7.46份，山藥、川續斷、黃芩、黃柏各5.60份，生甘草3.73份；

b1：將a1步驟中的全部飲片，放在煎煮容器中，一煎加8倍量水，浸泡30min，煎煮30min；第二次加6倍量水，煎煮20min，共煎煮2次，過濾，合并濾液，冷凍干燥成凍干粉，得保陰煎對照提取物。