[發(fā)明專(zhuān)利]表柔比星個(gè)體化用藥基因的指導(dǎo)方法及試劑盒

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• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 202011596250.8
• 申請(qǐng)日: 2020-12-29
• 公開(kāi)（公告）號(hào): CN112695094A
• 公開(kāi)（公告）日: 2021-04-23
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 陳濤;張靜;袁昕昕;林金飛
• 申請(qǐng)（專(zhuān)利權(quán)）人: 廣東南芯醫(yī)療科技有限公司
• 主分類(lèi)號(hào): C12Q1/6886
• 分類(lèi)號(hào): C12Q1/6886;C12Q1/6858;C12N15/11
• 代理公司: 上海上谷知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理有限公司 31342
• 代理人: 蔡繼清

1.一種表柔比星個(gè)體化用藥基因的指導(dǎo)試劑盒，其特征在于，所述試劑盒包括PCR擴(kuò)增引物對(duì)組，所述PCR擴(kuò)增引物對(duì)組包括特異性擴(kuò)增選自下組的SNP位點(diǎn)的引物對(duì)：rs7668258、rs915927、rs2854501、rs1143684和rs2279744。

2.如權(quán)利要求1所述的試劑盒，其特征在于，所述試劑盒還包括單堿基延伸引物組。

3.如權(quán)利要求1所述的試劑盒，其特征在于，所述PCR擴(kuò)增引物對(duì)組中：

特異性擴(kuò)增rs7668258的引物對(duì)如SEQ ID NO.1至SEQ ID NO.2所示；

特異性擴(kuò)增rs915927的引物對(duì)如SEQ ID NO.3至SEQ ID NO.4所示；

特異性擴(kuò)增rs2854501的引物對(duì)如SEQ ID NO.5至SEQ ID NO.6所示；

特異性擴(kuò)增rs1143684的引物對(duì)如SEQ ID NO.7至SEQ ID NO.8所示；和/或

特異性擴(kuò)增rs2279744的引物對(duì)如SEQ ID NO.9至SEQ ID NO.10所示。

4.如權(quán)利要求2所述的試劑盒，其特征在于，所述單堿基延伸引物組中：

針對(duì)rs7668258的延伸引物如SEQ ID NO.11所示；

針對(duì)rs915927的延伸引物如SEQ ID NO.12所示；

針對(duì)rs2854501的延伸引物如SEQ ID NO.13所示；

針對(duì)rs1143684的延伸引物如SEQ ID NO.14所示；和/或

針對(duì)rs2279744的延伸引物如SEQ ID NO.15所示。

5.如權(quán)利要求2所述的試劑盒，其特征在于，所述試劑盒包括第一容器，所述第一容器內(nèi)含有所述PCR擴(kuò)增引物對(duì)組；和/或

所述試劑盒包括第二容器，所述第二容器內(nèi)含有所述單堿基延伸引物組。

6.一種基于多重PCR飛行時(shí)間質(zhì)譜檢測(cè)表柔比星個(gè)體化用藥基因SNP基因突變位點(diǎn)的方法，其特征在于，包括以下步驟：

(1)以待測(cè)樣品外周血基因組DNA為模板，進(jìn)行PCR擴(kuò)增，得擴(kuò)增產(chǎn)物；

(2)應(yīng)用蝦堿式磷酸酶對(duì)步驟(1)的擴(kuò)增產(chǎn)物進(jìn)行SAP處理；

(3)使用延伸引物對(duì)步驟(2)純化后的產(chǎn)物進(jìn)行單堿基延伸反應(yīng)，得延伸產(chǎn)物；

(4)脫鹽樹(shù)脂純化延伸產(chǎn)物；

(5)質(zhì)譜平臺(tái)檢測(cè)分析，判斷是否存在基因變異。

7.如權(quán)利要求6所述的方法，其特征在于，所述步驟(1)中，PCR擴(kuò)增過(guò)程中，特異性擴(kuò)增選自下組的SNP位點(diǎn)：rs7668258、rs915927、rs2854501、rs1143684、rs2279744。

8.如權(quán)利要求6所述的方法，其特征在于，所述步驟(1)中，PCR擴(kuò)增過(guò)程中，使用所述擴(kuò)增引物對(duì)組進(jìn)行PCR擴(kuò)增；和/或

所述步驟(3)中，使用所述單堿基延伸引物組進(jìn)行單堿基延伸反應(yīng)。

9.PCR擴(kuò)增引物對(duì)組的用途，其特征在于，用于制備檢測(cè)試劑盒，所述檢測(cè)試劑盒用于檢測(cè)表柔比星個(gè)體化用藥基因SNP基因突變位點(diǎn)；

所述引物對(duì)組包括序列如SEQ ID NO.1至SEQ ID NO.10所示的引物。

10.單堿基延伸引物組的用途，其特征在于，用于制備檢測(cè)試劑盒，所述檢測(cè)試劑盒用于檢測(cè)表柔比星個(gè)體化用藥基因SNP基因突變位點(diǎn)；

所述單堿基延伸引物組包括序列如SEQ ID NO.11至SEQ ID NO.15所示的延伸引物。