[發(fā)明專(zhuān)利]一種仙鶴草配方顆粒特征圖譜鑒別方法

有效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 202011594894.3
• 申請(qǐng)日: 2020-12-29
• 公開(kāi)（公告）號(hào): CN112763618B
• 公開(kāi)（公告）日: 2022-03-01
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 周厚成;胡昌江;費(fèi)文波;付林;高銳;周維
• 申請(qǐng)（專(zhuān)利權(quán)）人: 四川新綠色藥業(yè)科技發(fā)展有限公司
• 主分類(lèi)號(hào): G01N30/02
• 分類(lèi)號(hào): G01N30/02;G01N30/06
• 代理公司: 成都天嘉專(zhuān)利事務(wù)所(普通合伙) 51211
• 代理人: 潘濤

1.一種仙鶴草配方顆粒特征圖譜鑒別方法，其特征在于，包括以下步驟：

（1）、供試品溶液的制備：取仙鶴草配方顆粒0.5g，精密稱(chēng)定，置具塞錐形瓶中，精密加入提取溶劑，稱(chēng)定重量，提取20-40min，放冷，再稱(chēng)定重量，用提取溶劑補(bǔ)足減失的重量，搖勻，濾過(guò)，取續(xù)濾液，即得；

（2）、參照物溶液的制備：取仙鶴草對(duì)照藥材1.0g，精密稱(chēng)定，置具塞錐形瓶中，精密加入提取溶劑，密塞，稱(chēng)定重量，提取20-40min，放冷，再稱(chēng)定重量，用提取溶劑補(bǔ)足減失的重量，搖勻，濾過(guò)，取續(xù)濾液，即得；另取槲皮苷、綠原酸、新綠原酸和隱綠原酸對(duì)照品適量，精密稱(chēng)定，加50%甲醇制成溶液，即得；

（3）、色譜條件如下：色譜柱：十八烷基硅烷鍵合硅膠為填料，柱長(zhǎng)為250 mm，內(nèi)徑為4.6mm，硅膠粒徑為5 μm；檢測(cè)器：二極管陣列檢測(cè)器，檢測(cè)波長(zhǎng)為324nm，理論板數(shù)按槲皮苷峰計(jì)算應(yīng)不低于5000；柱溫：30℃；流速：1.0mL/min；流動(dòng)相：甲醇-乙腈為流動(dòng)相A，以0.1%甲酸溶液為流動(dòng)相B，梯度脫洗；梯度洗脫程序?yàn)椋?/p>

0-5min，流動(dòng)相A由8％(v/v)升至10％(v/v)；

5-20min，流動(dòng)相A由10％(v/v)升至16％(v/v)；

20-25min，流動(dòng)相A保持16％(v/v)；

25-30min，流動(dòng)相A由16％(v/v)升至23％(v/v)；

30-50min，流動(dòng)相A由23％(v/v)升至30％(v/v)；

50-55min，流動(dòng)相A由30％(v/v)升至32％(v/v)；

55-70min，流動(dòng)相A由32％(v/v)升至55％(v/v)；

（4）、測(cè)試：分別精密吸取參照物溶液、供試品溶液各10μL，注入液相色譜儀，測(cè)定，即得。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種仙鶴草配方顆粒特征圖譜鑒別方法，其特征在于：步驟（1）中，所述供試品提取溶劑為甲醇或50%甲醇或70%甲醇或水或50%乙醇。

3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種仙鶴草配方顆粒特征圖譜鑒別方法，其特征在于：步驟（1）中，所述提取方式為回流提取或超聲提取。

4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種仙鶴草配方顆粒特征圖譜鑒別方法，其特征在于：步驟（1）中，所述提取時(shí)間為20min或30min或40min。

5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種仙鶴草配方顆粒特征圖譜鑒別方法，其特征在于：步驟（2）中，所述參照物提取溶劑為50%甲醇。

6.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種仙鶴草配方顆粒特征圖譜鑒別方法，其特征在于：步驟（2）中，取槲皮苷、綠原酸、新綠原酸和隱綠原酸對(duì)照品適量，精密稱(chēng)定，加50%甲醇制成每1mL含30μg的溶液，即得。

7.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種仙鶴草配方顆粒特征圖譜鑒別方法，其特征在于：所述的特征圖譜中應(yīng)呈現(xiàn)10個(gè)特征峰，其中峰1應(yīng)與相應(yīng)的參照物峰保留時(shí)間相同，其中與綠原酸參照物相應(yīng)的峰為S1峰，計(jì)算峰1-6與S1峰的相對(duì)保留時(shí)間，其相對(duì)保留時(shí)間應(yīng)在規(guī)定值的±5％之內(nèi)，各峰規(guī)定值為：峰2 0.882、峰3 1.000、峰4 1.099、峰5 1.444、峰6 1.483；與槲皮苷參照物相應(yīng)的峰為S2峰，計(jì)算峰7-10與S2峰的相對(duì)保留時(shí)間，其相對(duì)保留之間規(guī)定值在±5%之內(nèi)，規(guī)定值為峰7 0.972、峰8 1.000、峰9 1.023、峰10 1.457。