[發明專利]一種提高靈芝多糖含量的靈芝菌絲體培養方法

在審

• 申請號: 202011590154.2
• 申請日: 2020-12-29
• 公開（公告）號: CN112322508A
• 公開（公告）日: 2021-02-05
• 發明（設計）人: 杜新永;羅成盛;李先勝;趙丹丹;蓋春云;馬如霞;劉爽
• 申請（專利權）人: 青島潤達生物科技有限公司
• 主分類號: C12N1/14
• 分類號: C12N1/14;C12P19/04;C12R1/645
• 代理公司: 北京匯信合知識產權代理有限公司 11335
• 代理人: 夏靜潔

本發明公開了一種提高靈芝多糖含量的靈芝菌絲體培養方法，包括制備靈芝菌絲體PDA種子、制備靈芝菌絲體液體種子和發酵培養靈芝菌絲體。其中發酵培養靈芝菌絲體具體為先制備發酵培養基并滅菌，然后在搖床中培養，培養條件：接種量4%、溫度28℃、轉速160rpm/min，先培養2.5天，后流加10g滅菌的黃豆粉，再培養兩天結束發酵，收集靈芝菌絲體，并對靈芝菌絲體提取靈芝多糖。通過該方法獲得的靈芝菌絲球較小、數量更多，發酵周期更短、靈芝多糖含量更高，顯著降低了工業化生產成本、提高了企業的經濟效益。

技術領域

本發明涉及靈芝多糖技術領域，特別是涉及一種提高靈芝多糖含量的靈芝菌絲體培養方法。

背景技術

靈芝（Ganoderma spp.）是中國最著名的藥用真菌之一，它具有廣泛的藥理作用和極低的毒性，臨床上可用于輔助治療各種疾病，證明其具有抑制腫瘤、增強免疫、延緩衰老、保肝等功能。研究表明靈芝子實體和菌絲體組成沒有明顯的差別。傳統上，靈芝是通過野外采集或人工栽培獲得的。但靈芝子實體形成周期長，所需勞動強度大。隨著液體深層發酵技術的發展，已可以對許多大型真菌進行大規模培養。

靈芝多糖是靈芝菌絲體中主要活性成分，已證明靈芝多糖具有抗腫瘤、免疫調節、降血脂、降血糖、抗氧化和抗衰老等作用功能。靈芝多糖主要是通過調節機體免疫功能而達到抗腫瘤目的。靈芝多糖的免疫調節作用是各種作用的基礎,其免疫增強作用及免疫恢復作用的實現主要依賴于兩個方面：一是對免疫細胞直接作用的結果；另一是通過機體神經一內分泌一免疫系統的相互調節作用的實現。靈芝多糖具有抗腫瘤、抗血栓及抗凝血的作用。

現有技術培養的靈芝菌絲體所獲得的靈芝多糖含量不多，這顯著影響了靈芝多糖的得率。

發明內容

針對現有技術的不足，本發明的目的在于提供一種提高靈芝多糖含量的靈芝菌絲體培養方法。通過該方法獲得的靈芝菌絲球較小、數量更多，發酵周期更短、靈芝多糖含量更高，降低了工業化生產成本、顯著提高了企業的經濟效益。

為實現上述目的，本發明提供如下技術方案：

一種提高靈芝多糖含量的靈芝菌絲體培養方法，包括以下步驟：

（1）制備靈芝菌絲體PDA種子：首先將PDA培養基于120℃-125℃下滅菌30分鐘，取豆粒大小的靈芝菌絲體接種在PDA培養基上，在28℃的恒溫培養基中培養一周，收集PDA試管靈芝菌絲體種子，備用；

（2）制備靈芝菌絲體液體種子：制備液體種子培養基，然后于121℃下滅菌30分鐘；將靈芝菌絲體PDA種子在無菌環境下接種在液體種子培養基中，在搖床中培養，培養條件：溫度28℃、轉速160rpm/min，培養時間5天；收集靈芝菌絲體液體種子，備用；

（3）發酵培養靈芝菌絲體：制備發酵培養基并滅菌，將靈芝菌絲體液體種子接種在發酵培養基中，在搖床中培養，培養條件為：溫度28℃、轉速160rpm/min；培養2.5天，然后流加10g滅菌的黃豆粉，在同樣溫度下繼續培養兩天，結束發酵，收集靈芝菌絲體。

進一步地，步驟（1）于123℃下滅菌30分鐘。

進一步地，步驟（2）液體種子培養基配方為：酵母浸粉5 g，葡萄糖20g，蛋白胨5g,KH₂PO₄ 1g，MgSO₄·7H₂O 0.5 g，水1L。

進一步地，步驟（3）發酵培養基配方為：酵母浸粉5 g，葡萄糖 20g，蛋白胨5g，KH₂PO₄ 1g，MgSO₄·7H₂O 0.5g，水1L。

進一步地，步驟（3）靈芝菌絲體液體種子在發酵培養基上的接種量為4%。

本發明的有益效果體現在：